Caracterização e análise de DNAs repetitivos em Pseudis (Anura, Hylidae): cromossomos sexuais, mapeamento comparativo e dinâmica de DNAs satélites

Resumo

DNAs repetitivos compõem a maior parte do genoma de eucariotos e são divididos em duas grandes classes: (a) DNAs repetitivos in tandem e (b) DNAs repetitivos dispersos pelo genoma. Dentre os DNAs repetitivos in tandem há os DNAs satélites, principais componentes da heterocromatina, e as famílias multigênicas, como dos genes de histonas. A inerente natureza repetitiva dessas sequências sempre apresentou dificuldades de caracterizá-las a fundo em estudos de sequenciamento e montagem de genomas. Entretanto, novos métodos têm surgido para estudar melhor essa porção dos genomas usando sequências produzidas por abordagens de sequenciamento de nova geração (NGS). Com o uso de NGS e ferramentas de bioinformática pode-se estudar mais a fundo a composição de DNAs repetitivos em um dado genoma, bem como estudar a evolução dessas sequências e também gerar marcadores citogenéticos a fim de reconhecer cromossomos homeólogos entre espécies relacionadas filogeneticamente. No presente projeto é apresentada a proposta de se caracterizar a biblioteca de DNAs satélites presentes no anuro Pseudis tocantins usando sequenciamento de nova geração e algoritmos desenvolvidos para o estudo de sequências repetitivas. Em conjunto, propomos também isolar e mapear as sequências caracterizadas para P. tocantins em outras três espécies de Pseudis e uma de Lysapsus, a fim de estudar a dinâmica das sequências repetitivas, bem como inferir eventos de evolução cromossômica no gênero Pseudis. Também propomos isolar, caracterizar e mapear sequências de famílias multigênicas (e.g. genes de histona) a fim de inferir homeologia cromossômica e também testar a aplicabilidade dessa abordagem em levantar caracteres de interesse taxonômico/filogenéticos para o gênero Pseudis. Por último, propomos testar a hipótese da existência de outros DNAs satélites estarem presentes no cromossomo W de P. tocantins, bem com identificar sequências repetitivas que possam ser exclusivas do cromossomo Z dessa espécie.