Um lugar estressante para viver: um aprendizado profundo sobre as pressões seletivas em leveduras durante as fermentações alcoólicas

Resumo

A crescente demanda pelo uso de energia, o consenso sobre a necessidade de reduzir significativamente as emissões de gases causadores do efeito estufa e a dependência de combustíveis fósseis estão impulsionando o desenvolvimento e a melhoria da produção de biocombustíveis. O etanol é o biocombustível mais utilizado, obtido a partir da fermentação de açúcares extraídos principalmente da cana-de-açúcar (Brasil) e do milho (EUA). Apesar dessa grande produção, grandes esforços estão sendo feitos para aumentar esses números, e uma das opções seria a produção do etanol de segunda geração (2G). O etanol 2G é produzido pela fermentação de açúcares (hexoses e pentoses) liberados a partir de polissacarídeos complexos encontrados na biomassa vegetal. No entanto, para o uso de materiais lignocelulósicos e a produção de etanol 2G, é necessário que alguns desafios biotecnológicos sejam superados. Várias dificuldades tecnológicas precisam ser resolvidas, como romper a recalcitrância da parede celular do bagaço para aumentar a despolimerização e liberação de açúcares para fermentação. Durante este processo, alguns compostos tóxicos são liberados, como os ácidos orgânicos, furanos e fenólicos, que ameaçam a sobrevivência e desempenho da levedura. Por exemplo, esses inibidores podem provocar um gasto excessivo de ATP, estresse oxidativo, danos ao DNA, perda de integridade da membrana e outros. Nosso grupo desenvolveu anteriormente uma cepa modificada da levedura Saccharomyces cerevisiae com uma eficiente capacidade de fermentar xilose e produzir etanol com rendimentos acima de 92% do máximo teórico. O próximo passo é aumentar a tolerância de levedura a estes compostos tóxicos. Para desenvolver linhagens mais robustas e eficientes para tecnologias 2G, é necessário um profundo conhecimento do comportamento das leveduras expostas a diferentes tipos de estresse, para entender as bases moleculares das respostas fisiológicas do estresse e entender como elas são integradas. Para isso, realizaremos análises sobre a dinâmica populacional antes e depois de um processo de evolução adaptativa em larga escala de exposição a diferentes tipos de estresse, para entender como os alelos são fixados sob pressões seletivas. Para validar os resultados da variação genômica, será realizada uma análise transcriptômica comparativa durante a fermentação, sob diferentes pressões. Assim, nossa proposta é realizar um estudo detalhado sobre a fisiologia das leveduras através de uma abordagem multi-ômica em larga escala, visando integrar dados de populações evoluídas e tolerantes. Resultados preliminares do nosso grupo mostraram que a combinação de diferentes estresses durante a evolução adaptativa potencializa a assimilação de açúcar e tolerância. Esse trabalho explorará esse fenômeno, discriminando os efeitos isolados de cada estresse e desvendando uma rede de regulação gênica responsável pela ativação de cada sistema. Dessa forma, nosso trabalho impulsionará o desenvolvimento de uma cepa resistente a inibidores, que tem um papel fundamental para tornar o etanol 2G uma alternativa viável no Brasil. (AU)