Efeitos da expressão da proteína RPMS1 do vírus de Epstein-Barr em células humanas cultivadas in vitro

Resumo

O vírus Epstein-Barr (EBV) - formalmente humano gammaherpesvirus 4 (HHV-4) - é um herpesvírus associado ao desenvolvimento de uma variedade de malignidades humanas, notavelmente o linfoma de Burkitt (BL) e o carcinoma nasofaríngeo (NPC), mas também subconjuntos de casos de linfoma de Hodgkin e não-Hodgkin (particularmente em pacientes imunocomprometidos) e carcinomas gástricos. O genoma viral é detectado em células neo-plásicas em praticamente todos os casos de NPC indiferenciado, um câncer agressivo endê-mico na Ásia e em algumas regiões do norte da África. Além da infecção por EBV, outros fatores contribuem para a etiopatogenia da NPC, como o background genético individual e hábitos culturais, como o consumo de peixe salgado no estilo chinês e o uso de algumas plantas na medicina tradicional. O potencial oncogênico do EBV está associado a produtos virais que interferem em processos biológicos críticos, como estabilidade genética, regulação da apoptose e capacidade de imortalização. Até o momento, o principal produto onco-gênico do EBV é a membrana protéica latente 1 (LMP1), que causa ativação constitutiva do NF-kB, entre outras atividades. No entanto, apenas recentemente foram investigados outros produtos virais, como a proteína EBV RPMS1, que é gerada por processamento alternativo (splicing) do segmento transcrito BamHI A direito (BART) do genoma viral. São escassos os dados sobre as propriedades biológicas da RPMS1, mas essa proteína viral foi implicada na modulação da via Notch e possivelmente contribui para a transformação celular induzida pelo EBV. Digno de nota, um polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) A/G na posição 155391 na ORF de RPMS1 foi associado com risco aumentado de NPC. Assim, este estudo visa investigar os efeitos da expressão de EBV RPMS1 em células humanas cultivadas in vi-tro. Para tanto, vetores lentivirais para expressão induzível de da proteína viral serão gera-dos e utilizados para infecção de células imortalizadas de epitélio nasofaríngeo, após o que serão avaliadas quanto à viabilidade celular, apoptose, migração celular e invasão celular in vitro.