Perfil global de alterações em RNA não-codificantes na próstata ventral de ratos jovens submetidos à restrição proteica materna perinatal

Resumo

Nas últimas décadas, tem sido observado um aumento na incidência de distúrbios metabólicos, como obesidade, diabetes e até alguns tipos de câncer. Evidências epidemiológicas mostram que essas doenças podem se originar de insultos sofridos por indivíduos durante a vida intra-uterina, condição conhecida como Programação Fetal (FP). O período perinatal é caracterizado por alta plasticidade e capacidade do embrião/feto para se adaptar às mudanças ambientais, alterando a expressão gênica através de mecanismos epigenéticos. Recentemente, nosso grupo demonstrou que a restrição protéica materna promove carcinogênese da próstata em ratos descendentes mais velhos; entretanto, os mecanismos moleculares envolvidos nesse processo permanecem inexplorados. O advento do sequenciamento de nova geração revelou a importância do transcriptoma não-codificante na modulação de processos celulares. Assim, pretendemos identificar o perfil global de pequenos RNAs não-codificadores (microRNAs, RNAs interagindo com piwi) desregulados em amostras de próstata de ratos submetidos a uma dieta maternal de baixa proteína durante o período perinatal. Neste estudo, ratos machos Sprague Dawley nascidos de mães alimentadas com dieta padrão (17% de proteína) ou com baixo teor protéico (6% de proteína) durante a gestação e lactação foram eutanasiados no 21º dia pós-natal e (concluído o procedimento no Brasil). A próstata ventral foi processada para sequenciamento de RNA pequeno, usando a plataforma HiSeq-2500 Illumina (etapa concluída na Coreia do Sul). Durante o estágio de 6 meses, compararemos nossos dados microRNome com os dados de adenocarcinoma prostático humano disponíveis no banco de dados do "Atlas do Genoma do Câncer" (TCGA), a fim de encontrar possíveis vias moleculares desreguladas na próstata de descendentes restritos que possam estar relacionadas para o desenvolvimento de lesões prostáticas em animais mais velhos. Análises in-silico serão realizadas para predizer os alvos de mRNA dos microRNAs alterados, seguidos da construção de redes reguladoras e vias ontológicas. Esses dados serão utilizados para validação de alvos por RT-qPCR, western blotting e análise funcional quando o Candidato retornar ao Brasil. Assim, esperamos não apenas melhorar o conhecimento atual sobre como o desenvolvimento da próstata é afetado pela exposição materna à dieta com baixa proteína, mas também identificar potenciais vias de sinalização comuns entre o desenvolvimento da carcinogênese da próstata de ratos e humanos. O estágio no Laboratório do Dr. Lam fornecerá à PhD Candidata Flávia Bessi Constantino experiência em bioinformática, particularmente em habilidades básicas de programação, bem como no processamento e análise de big data. Essas habilidades serão úteis para o avanço de sua pesquisa de doutorado quando ela retorna ao Brasil. (AU)