Papel dos receptores B2 de bradicinina na modulação de respostas defensivas associadas ao pânico: vias de sinalização intracelular envolvidas e interação com receptores µ-opioide

Resumo

O transtorno do pânico caracteriza-se pela presença de ataques do pânico inesperados e recorrentes. Estudos mostram que a ativação da substância cinzenta periaquedutal dorsal (SCPd) promove respostas comportamentais e fisiológicas associadas ao pânico. Recentemente, mostramos que a administração de bradicinina intra-SCPd em ratos expostos ao teste da estimulação elétrica da SCPd promove efeito antipânico. Este efeito mostrou-se depender da ativação de receptores B2 de bradicinina (B2R) e µ-opioide (MOR) na SCPd, sugerindo a ocorrência de heterodimerização ou de comunicação cruzada entre vias de sinalização. Neste projeto estenderemos as investigações quanto ao potencial de B2R como alvo para o desenvolvimento de novas drogas antipânico. Nosso objetivo inicial será o de identificar a via de sinalização de B2R que é recrutada para o efeito antipânico. Para isso, usaremos ligantes tendenciosos (do inglês "biased agonism") para Gq, Gi e/ou ²-arrestina, que serão administrados, tanto diretamente na SCPd, como intravenosamente, em ratos expostos aos testes da estimulação elétrica da SCPd e da hipóxia. Na sequência, faremos ensaios in vitro para caracterizar a interação do B2R com o MOR. Para isso, utilizaremos a técnica de transferência de energia por ressonância de bioluminescência (BRET), para observar se estes receptores formam heterodímeros. Também veremos se há sinalização cruzada entre estes receptores. Por fim, para fortalecer os achados observados in vitro, faremos estudos ex vivo para verificar se ocorre a co-localização de B2R e MOR em neurônios presentes na SCPd, com auxílio de microscopia eletrônica.