Estudo estrutural da interação da crotoxina e suas subunidades com membranas-modelo e inibidores

Resumo

A crotoxina (CTX) é a mais abundante toxina presente no veneno da Crotalus durissus terrificus, representando cerca de 60% do peso seco do veneno bruto desta serpente. A CTX possui atividades neurotóxica, miotóxica e coagulante, sendo a principal responsável pelo elevado número de óbito em acidentes ofídicos causados por serpentes do gênero Crotalus. Além dessas características, foram descobertas ações da crotoxina com possíveis aplicações terapêuticas, por conta de seus efeitos anti-inflamatórios, analgésicos, imunomodulatórios e antitumorais. A CTX é um heterodímero composto por duas subunidades, uma ácida (CA) e outra básica (CB), sendo a última uma fosfolipase A2 com atividade pré-sináptica de bloqueio da transmissão neuromuscular, provocando paralisias motora e respiratória nos animais. Embora as estruturas cristalográficas e por espalhamento de raios X a baixo ângulo de CTX e CB tenham sido resolvidas, pouco se sabe sobre a ação destas nas membranas celulares bem como da localização dos sítios de interação destas proteínas com as membranas alvo. Assim, propomos neste projeto estudos estruturais da atuação da crotoxina e suas subunidades sobre membranas modelo e também acerca da interação desta proteína com diferentes inibidores. Para tanto, serão utilizadas as técnicas de espectroscopia de fluorescência, espalhamento de raios X a baixo ângulo, calorimetria de titulação isotérmica e cristalografia de proteínas. Deste modo, espera-se propor um modelo de ação da crotoxina e suas subunidades sobre membranas biológicas e identificar os sítios de interação destas proteínas com a membrana alvo. (AU)