Análise genômica de espécies crípticas de Aspergillus

Resumo

Aspergillus é um gênero de fungos filamentosos industrialmente importantes, empregados na produção de ácidos, enzimas, agentes anticâncer e metabólitos secundários. No entanto, estes fungos são também importantes devido ao impacto na saúde humana. Aspergillus fumigatus, um patógeno presente no ambiente e no ar, e o oportunista mais comum em infecção pulmonar, é o agente causador de Aspergilose Invasiva. A. nidulans, um organismo referência, também tem sido reportado infectando pacientes imunocomprometidos, em particular com doença granulomatosa crônica. O aumento da resistência aos poucos antifúngicos disponíveis, como azois e equinocandinas, é uma preocupação global. Além destas duas espécies, espécies crípticas que são morfologicamente indistinguíveis de A. fumigatus e A. nidulans, mas geneticamente diferentes (e podendo ser distinguidas usando métodos moleculares), têm sido reportadas em casos clínicos. O exemplo mais notável de tais espécies crípticas é o A. lentulus, para o qual resistência a drogas já foi reportada. Estudos de Sequenciamento Total de Genoma podem ser realizados para a caracterização genotípica de fungos e para ter insights sobre seus modos reprodutivos, seja sexual, assexual ou parassexual. Adicionalmente, eles podem ser realizados para caracterização de alterações de ploidia, de aneuploidia, hibridizações e perda de heterozigosidade. Apesar do amplo estudo genômico em espécies do gênero, nenhum trabalho publicado até o momento analisou genomas de espécies crípticas de Aspergillus. Nosso grupo caracterizou isolados clínicos de A. nidulans que apresentaram diferentes ploidias e suas sequências genômicas revelaram baixas taxas de mapeamento (30 a 70 por cento) no genoma de referência, A. nidulans A4, sugerindo que eles poderiam ser possíveis híbridos. Este projeto pretende caracterizar os genomas de espécies crípticas de Aspergillus isolados de amostras ambientais e de casos clínicos de diversas regiões do mundo, para os quais o método EUCAST (The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing) foi usado para caracterizar a resistência a antifúngicos. Em particular, serão buscados: i) genes envolvidos com a reprodução sexuada, ii) possíveis eventos genéticos, como alteração de ploidia, hibridização e perda de heterozigosidade, e iii) genes previamente caracterizados no envolvimento da resistência a antifúngicos. Espera-se que a caracterização genômica das espécies crípticas forneça informação para concluir se elas são espécies verdadeiras ou resultados de eventos de hibridização interespecífica. Adicionalmente, espera-se que uma melhor caracterização genômica auxilie na diferenciação de espécies crípticas e seja importante para guiar terapia clínica.