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Monitoramento de cianobactérias e cianotoxinas em dois reservatórios subtropicais por PCR quantitativo em tempo real

Processo: 18/00394-2
Modalidade de apoio:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Vigência (Início): 02 de maio de 2018
Vigência (Término): 01 de novembro de 2018
Área do conhecimento:Engenharias - Engenharia Sanitária - Saneamento Ambiental
Pesquisador responsável:Maria do Carmo Calijuri
Beneficiário:Munique de Almeida Bispo Moraes
Supervisor: Niels Ole Gerslev Jørgensen
Instituição Sede: Escola de Engenharia de São Carlos (EESC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
Local de pesquisa: University of Copenhagen, Copenhagen, Dinamarca  
Vinculado à bolsa:15/21191-4 - Variabilidade espaço-temporal de cianobactérias no Reservatório do Lobo (Itirapina, SP): composição da comunidade, análises moleculares e de toxinas, BP.DR
Assunto(s):Limnologia   Cianobactérias   Cianotoxinas   Eutrofização   Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR)
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Eutrofização | mcyA | qPCR | RNAr 16S | sxtA | Limnologia

Resumo

As cianobactérias são conhecidamente produtoras de cianotoxinas e a ocorrência de florações potencialmente tóxicas em reservatórios de abastecimento público tem sido cada vez mais frequente devido ao processo de eutrofização. Dentre as cianotoxinas produzidas pelas cianobactérias destacam-se a microcistina e saxitoxina. Esses metabólitos são biossintetizados por dois grupos de genes conhecidos como mcy e sxt, respectivamente. A detecção desses genes a partir de PCR quantitativo em tempo real (qPCR) permite a distinção das cepas tóxicas e não tóxicas, impossíveis de diferenciação apenas pela morfologia. Desse modo, o objetivo deste projeto é investigar a ocorrência de cianobactérias potencialmente produtoras de cianotoxinas em dois reservatórios subtropicais, Lobo e Itupararanga, via amplificação dos genes RNAr 16S, mcyA e sxtA por qPCR. Foram realizadas quatro amostragens durante um ano na cabeceira e barragem de ambos os reservatórios, em duas profundidades (superfície e limite inferior da zona fótica). Após a extração do DNA total e verificação de sua integridade e concentração, as reações de amplificação dos genes alvos serão realizadas com a utilização de iniciadores específicos. As curvas padrão serão estabelecidas relacionando as concentrações dos fragmentos alvos com o ciclo limiar (o número do ciclo de PCR em que a fluorescência passa um nível limiar estabelecido) para os três genes analisados. Com a finalização da análise de qPCR, os resultados obtidos serão relacionados a variáveis biológicas e físico-químicas da água como a abundância de cianobactérias, concentração de cianotoxinas, temperatura da água e razão NT:PT para compreender a dinâmica de ocorrência de cianobactérias e cianotoxinas nos dois ambientes estudados. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
MORAES, MUNIQUE DE ALMEIDA BISPO; RODRIGUES, RAPHAELLA DE ABREU MAGALHAES; PODDUTURI, RAJU; JORGENSEN, NIELS OLE GERSLEV; CALIJURI, MARIA DO CARMO. Prediction of Cyanotoxin Episodes in Freshwater: A Case Study on Microcystin and Saxitoxin in the Lobo Reservoir, Sao Paulo State, Brazil. ENVIRONMENTS, v. 10, n. 8, p. 16-pg., . (16/09405-1, 18/00394-2, 15/21191-4)
MORAES, MUNIQUE A. B.; RODRIGUES, RAPHAELLA A. M.; SCHLUTER, LOUISE; PODDUTURI, RAJU; JORGENSEN, NIELS O. G.; CALIJURI, MARIA C.. Influence of Environmental Factors on Occurrence of Cyanobacteria and Abundance of Saxitoxin-Producing Cyanobacteria in a Subtropical Drinking Water Reservoir in Brazil. WATER, v. 13, n. 12, . (15/21191-4, 16/09405-1, 18/00394-2)
PODDUTURI, RAJU; SCHLUTER, LOUSE; LIU, TINGTING; SAVIOLO OSTI, JOAO ALEXANDRE; BISPO MORAES, MUNIQUE DE ALMEIDA; JORGENSEN, NIELS O. G.. Monitoring of saxitoxin production in lakes in Denmark by molecular, chromatographic and microscopic approaches. HARMFUL ALGAE, v. 101, . (18/00394-2, 15/21191-4)

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