Efeito da cell sheet de células-tronco da polpa dentária humana, associada ou não à terapia de fotobiomodulação, na regeneração de lesões ósseas críticas em calvárias de ratos portadores de Diabetes Mellitus tipo 2

Resumo

Diabetes mellitus (DM) compromete a reparação óssea, gerando a necessidade de novas estratégias terapêuticas. Uma delas se baseia nos cultivos do tipo " Cell Sheets " (MC, Membranas Celulares) que preservam o contato célula-célula, a organização estrutural e o fenótipo de células-tronco (CTs). A terapia de fotobiomodulação (PBMT) também induz efeitos benéficos que favorecem a terapia celular. O objetivo deste estudo será o de avaliar o efeito do uso de MCs de CTs da polpa dentária humana, associadas ou não à PBMT, na regeneração de lesões ósseas críticas em calvária de ratos diabéticos (ZDF). O estudo terá 2 etapas: uma in vitro (obtenção das MCs) e uma in vivo. Em 72 ratos diabéticos serão realizadas lesões ósseas críticas estandardizadas no osso parietal que serão então tratadas de acordo com os seguintes grupos experimentais (n=12 por grupo): GI: Controle negativo: lesão sem tratamento adicional; GII: Controle Positivo: Colocação de membrana de colágeno suíno comercial (BioGideTM); GIII: Colocação da BioGideTM seguida da aplicação da PBMT; GIV: Colocação da MC; GV: Colocação da MC seguida da PBMT e GVI: lesão sem tratamento adicional seguida de PBMT. A PBMT será realizada com laser infravermelho (780nm, 40 mW, 0,04 cm2 de área do feixe, 1 W/cm2, 3s, 3J/cm2, 0,12J por ponto) imediatamente, 48 e 96 horas após a cirurgia. Quatro e 8 semanas após a cirurgia a calota craniana será dissecada, fixada e submetida às análises: por microtomografia computadorizada (MicroCT), histológica (HE), histoquímica (Picro Sirius e TRAP) e imunoistoquímica (cell tracking-BrDU e marcadores do processo de osteogênese). Os dados serão tratados estatisticamente (pd0,05).