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Análise da diversidade estrutural e funcional das enzimas pertencentes à família GH43 em Xanthomonas axonopodis pv. citri: implicações biológicas e possíveis aplicações biotecnológicas

Processo: 16/19995-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de agosto de 2017
Vigência (Término): 14 de junho de 2020
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
Pesquisador responsável:Mário Tyago Murakami
Beneficiário:Mariana Abrahão Bueno de Morais
Instituição Sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:15/26982-0 - Explorando novas estratégias para a despolimerização de polissacarídeos da parede celular vegetal: da estrutura, função e desenho racional de hidrolases glicosídicas às implicações biológicas e potenciais aplicações biotecnológicas, AP.TEM
Bolsa(s) vinculada(s):18/22138-8 - Desvendando o papel do cálcio na catálise de beta-xilosidases / alfa-L-arabinofuranosidases da família GH43 através de métodos de dinâmica molecular "QM / MM", BE.EP.PD
Assunto(s):Cristalografia de raios X   Estrutura   Xanthomonas
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Cristalografia de raios X | Estrutura | família GH43 | função | hidrolases glicosídicas | Xanthomonas | Cristalografia de raios X

Resumo

Enzimas que degradam a parede celular vegetal têm atraído grande interesse da comunidade científica seja pelos seus inúmeros papeis biológicos ou pela grande aplicabilidade em diversos processos industriais como, por exemplo, na produção de biocombustíveis, papel, tecidos, alimentos e bebidas. Entretanto, o processo de despolimerização da parede celular vegetal por rotas enzimáticas ainda não está totalmente consolidado e nem se encontra economicamente viável, tornando necessário o desenvolvimento de novas estratégias e processos bioquimicamente mais eficientes. Organismos fitopatogênicos como fungos e bactérias, possuem um grande arsenal de hidrolases glicosídicas (GH), enzimas que atuam sobre a porção polissacarídica da parede celular vegetal, facilitando o processo infeccioso, fornecendo nutrientes e atuando na mediação das interações planta-patógeno. Assim, elucidar os mecanismos moleculares dessas enzimas, além do apelo biotecnológico, é também de grande importância para melhor compreender seu papel no desenvolvimento do fitopatógeno, bem como nos eventos biológicos associados à interação planta-patógeno. Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac), causadora do cancro cítrico, possui um elevado número de GHs e, entre elas, destacam-se as enzimas pertencentes à família GH43 que estão representadas por múltiplos genes, sugerindo a existência de divergência funcional e distintos papeis biológicos. Além disso, essa família é notoriamente onipresente em organismos especializados na maceração de biomassa vegetal, atuando na degradação dos principais polissacarídeos que formam a fração hemicelulósica, como xilanos e arabinanos. A família GH43 é definida como poliespecífica pela grande diversidade funcional e, por isso, foi dividida em 37 subfamílias. Dentre esta nova classificação, inúmeras subfamílias ainda permanecem completamente desconhecidas, como por exemplo a subfamília 9 que está presente no genoma de Xac. Desta forma, esse projeto visa o entendimento mecanístico das enzimas GH43 de Xac, utilizando uma abordagem estrutural, bioquímica e celular que permitirá inferir suas funções para o fitopatógeno (seja na virulência, sinalização, interação planta-patógeno ou/e nutrição) e também estimar seus potenciais biotecnológicos, uma vez que essa família ainda é pouco explorada e tem forte correlação com a maceração de parede celular vegetal.

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Publicações científicas (12)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DE SOUSA, AMANDA S.; DE MELO, RICARDO R.; MIYAMOTO, RENAN Y.; MORAIS, MARIANA A. B.; ANDRADE, LILIANE P.; MILAN, NATALIA; DE AVILA, MAYARA C.; DE SOUZA, CLAUDIA M.; ADAO, REGINA C.; SCARPASSA, JOSIANE A.; et al. A rationally identified marine GH1 beta-glucosidase has distinguishing functional features for simultaneous saccharification and fermentation. BIOFUELS BIOPRODUCTS & BIOREFINING-BIOFPR, . (16/19995-0, 17/14253-9, 18/02865-2, 15/26982-0, 16/06509-0, 19/08855-1)
VIEIRA, PLINIO S.; BONFIM, ISABELA M.; ARAUJO, EVANDRO A.; MELO, RICARDO R.; LIMA, AUGUSTO R.; FESSEL, MELISSA R.; PAIXAO, DOUGLAS A. A.; PERSINOTI, GABRIELA F.; ROCCO, SILVANA A.; LIMA, TATIANI B.; et al. Xyloglucan processing machinery in Xanthomonas pathogens and its role in the transcriptional activation of virulence factors. NATURE COMMUNICATIONS, v. 12, n. 1, . (17/14253-9, 15/26982-0, 16/06509-0, 15/13684-0, 18/03724-3, 19/13936-0, 17/00203-0, 16/19995-0)
CABRAL, LUCELIA; PERSINOTI, GABRIELA F.; PAIXAO, DOUGLAS A. A.; MARTINS, MARCELE P.; MORAIS, MARIANA A. B.; CHINAGLIA, MARIANA; DOMINGUES, MARIANE N.; SFORCA, MAURICIO L.; PIROLLA, RENAN A. S.; GENEROSO, WESLEY C.; et al. ut microbiome of the largest living rodent harbors unprecedented enzymatic systems to degrade plant polysaccharide. NATURE COMMUNICATIONS, v. 13, n. 1, . (15/26982-0, 16/19995-0)
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MARIUTTI, RICARDO B.; HERNANDEZ-GONZALEZ, JORGE E.; NASCIMENTO, ANDREY F. Z.; DE MORAIS, MARIANA A. B.; MURAKAMI, MARIO T.; CARARETO, CLAUDIA M. A.; ARNI, RAGHUVIR K.. A single P115Q mutation modulates specificity in the Corynebacterium pseudotuberculosis arginine repressor. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-GENERAL SUBJECTS, v. 1864, n. 7, . (18/07977-3, 15/13765-0, 16/19995-0, 15/18868-2, 18/10736-8, 16/24587-9)
DE MORAIS, MARIANA ABRAHAO BUENO; POLO, CARLA CRISTINA; DOMINGUES, MARIANE NORONHA; PERSINOTI, GABRIELA FELIX; PIROLLA, RENAN AUGUSTO SIQUEIRA; DE SOUZA, FLAVIO HENRIQUE MOREIRA; CORREA, JESSICA BATISTA DE LIMA; DOS SANTOS, CAMILA RAMOS; MURAKAMI, MARIO TYAGO. Exploring the Molecular Basis for Substrate Affinity and Structural Stability in Bacterial GH39 beta-Xylosidases. FRONTIERS IN BIOENGINEERING AND BIOTECHNOLOGY, v. 8, . (16/19995-0, 13/24622-0, 15/26982-0)
MORAIS, MARIANA A. B.; COINES, JOAN; DOMINGUES, MARIANE N.; PIROLLA, RENAN A. S.; TONOLI, CELISA C. C.; SANTOS, CAMILA R.; CORREA, JESSICA B. L.; GOZZO, FABIO C.; ROVIRA, CARME; MURAKAMI, MARIO T.. Two distinct catalytic pathways for GH43 xylanolytic enzymes unveiled by X-ray and QM/MM simulations. NATURE COMMUNICATIONS, v. 12, n. 1, . (18/22138-8, 16/19995-0, 15/26982-0)
DOMINGUES, MARIANE NORONHA; MOREIRA SOUZA, FLAVIO HENRIQUE; VIEIRA, PLINIO SALMAZO; BUENO DE MORAIS, MARIANA ABRAHAO; ZANPHORLIN, LETICIA MARIA; DOS SANTOS, CAMILA RAMOS; SIQUEIRA PIROLLA, RENAN AUGUSTO; HONORATO, RODRIGO VARGAS; LOPES DE OLIVEIRA, PAULO SERGIO; GOZZO, FABIO CESAR; et al. Structural basis of exo--mannanase activity in the GH2 family. Journal of Biological Chemistry, v. 293, n. 35, p. 13636-13649, . (16/06509-0, 15/26982-0, 16/19995-0, 13/24622-0)
DE SOUSA, AMANDA S.; DE MELO, RICARDO R.; MIYAMOTO, RENAN Y.; MORAIS, MARIANA A. B.; ANDRADE, LILIANE P.; MILAN, NATALIA; DE AVILA, MAYARA C.; DE SOUZA, CLAUDIA M.; ADAO, REGINA C.; SCARPASSA, JOSIANE A.; et al. A rationally identified marine GH1 beta-glucosidase has distinguishing functional features for simultaneous saccharification and fermentation. BIOFUELS BIOPRODUCTS & BIOREFINING-BIOFPR, v. 14, n. 6, p. 17-pg., . (19/08855-1, 17/14253-9, 18/02865-2, 15/26982-0, 16/06509-0, 16/19995-0)

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