Estabelecimento de técnicas de vacina de RNA fazendo uso de RNA autorreplicativo estabilizado por lipossomos catiônicos in vitro e in vivo

Resumo

Neste projeto, propomos a utilização de RNAs autorreplicativos internalizados em lipossomos catiônicos, como sistema de entrega dessas moléculas nas células-alvo, capazes de gerar efeitos terapêuticos in vitro e in vivo. Inicialmente, lipossomos catiônicos serão analisados em relação a seus parâmetros físico-químicos como carga, tamanho e capacidade de proteger RNA internalizado em seu interior. Posteriormente, serão realizados ensaios em lipossomos variando a concentração de RNA autorreplicativo contendo os genes reporteres gfp e luciferase, de forma a encontrar a melhor relação lipossomo-RNA autorreplicativo a ser usada em ensaios in vitro. Para o uso dos lipossomos em animais, os experimentos seguirão com as formulações caracterizadas in vitro, que serão usadas em imunizações dérmicas para validação dos dados in vivo. Finalmente, o efeito dessas imunizações será comparado com aquele gerado por vacinas de DNA, fazendo uso de um sistema de imageamento in vivo (IVIS) com a finalidade de obter uma comparação de eficiência destes modelos vacinais. Uma vez caracterizado, esse sistema poderá influenciar estudos de imunização com antígenos relevantes para Plasmodium sp., parasita causador da malária humana.