Mecanismos de resistência ao tratamento com temozolomida em células de glioma

Resumo

Pacientes com glioblastoma, o tipo mais comum de neoplasia maligna do cérebro em adultos, apresentam prognósticos ruins com os protocolos terapêuticos disponíveis, sendo temozolomida (TMZ) a principal droga utilizada no tratamento desse tumor. TMZ é um agente alquilante que causa metilação no DNA e uma ampla gama de lesões no DNA (genômico e mitocondrial), levando a morte celular. Porém, tumores tratados com TMZ contam com diversos mecanismos de resistência. Um dos mecanismos principais refere-se a capacidade de reversão direta da lesão no DNA por MGMT (Metil Guanina Metil Transferase), cuja perda de expressão está associada a melhor prognóstico e sobrevida em pacientes tratados com TMZ. O aumento no nível de espécies reativas de oxigênio (ROS) também tem sido associada à resistência a TMZ. Nosso grupo mostrou que glutationa (GSH), um peptídeo que tem um papel crucial na manutenção da homeostase redox das células, previne a morte celular por TMZ, em mecanismo mediado pelo fator de transcrição NRF2. Porém não é claro se esse mecanismo envolve diretamente a redução de metilação do DNA genômico (e portanto sujeito à ação de MGMT) ou por dano gerado pelo estresse oxidativo. Sendo assim, a ideia inicial deste projeto é verificar, através da super-expressão de MGMT em células de glioma, qual o papel de metilações no DNA na morte induzida por TMZ, em relação a lesões provocadas pelo estresse oxidativo, em condições que os níveis de GSH é modulado.Outros mecanismos de resistência a TMZ já foram relatados. Através da geração de bibliotecas utilizando o sistema CRISPR (clustered regurlaly interspaced short palindrome repeats)-Cas9 (CRISPR-associated nuclease 9) (CRISPR-Cas9), nosso grupo identificou uma lista de genes potencialmente associados à resistência com TMZ. Entre esses genes a via de anemia Fanconi nos chamou atenção devido ao seu papel no reparo de DNA. É nossa expectativa que esse estudo forneça não apenas um melhor conhecimento dos mecanismos envolvidos na proteção das células tumorais ao tratamento com TMZ, como nos forneça dados que permitam oferecer alternativas para potencializar os efeitos quimioterápicos desse fármaco. (AU)