Expressão e purificação de variantes alélicas do Antígeno 1 de Membrana Apical (AMA-1) de Plasmodium vivax visando estudos imunológicos

Resumo

A malária é uma das prioridades da pesquisa mundial na área de desenvolvimento de vacinas, sendo o Plasmodium vivax a espécie com maior distribuição geográfica no mundo e a mais prevalente nas Américas. Ao contrário de Plasmodium falciparum, atualmente não há nenhuma vacina contra o P. vivax em fase de testes clínicos avançados. Embora os esforços para o delineamento de vacinas contra o P. vivax tenham sido importantes, uma limitação para tal é a presença de polimorfismos antigênicos, um fator crucial para a maioria das vacinas candidatas como PvAMA1. Para eliminar esta lacuna pretendemos investigar a presença de polimorfismos em 4 variantes alélicas de PvAMA1. O objetivo é expressar e purificar as proteínas recombinantes representando as seguintes formas alélicas de AMA1 de P. vivax: PvAMA-PNG_62_MU, PvAMA-TC103, PvAMA-Chesson-I e PvAMA-PNG_5. Para tal, as variantes alélicas de PvAMA1 serão expressas em leveduras Pichia pastoris e purificadas por cromatografia de afinidade e troca iônica. A sua detecção será confirmada por immunoblotting e o grau de pureza por cromatografia de alta performance (HPLC). Esses dados no futuro serão valiosos para o estudo do impacto do polimorfismo de PvAMA1 no reconhecimento por anticorpos específicos, visando contribuir para o desenvolvimento de uma vacina global com alelos múltiplos eficazes, contra a malária causada por P. vivax. (AU)