Investigação do mecanismo funcional e molecular da proteína ligante de RNA PCBP1 no coração

Resumo

A cardiomiopatia é um transtorno humano comum que se caracteriza por disfunção contrátil e remodelamento cardíaco, geralmente acompanhada de intolerância ao exercício e anormalidades do músculo esquelético. Mutações genéticas e expressão alterada de genes que codificam muitas moléculas sinalizadoras e proteínas contráteis estão associadas com cardiomiopatia; Contudo, a forma como os cardiomiócitos sentem stress fisiopatológicos para então modular o remodelamento cardíaco e a função permanece mal compreendida. As proteínas ligantes de RNA poli (C) (PCBPs) são conhecidas como proteínas de ligação a RNA que desempenham papéis importantes na expressão de genes através da sua capacidade para ligar em regiões poli (C). Elas estão envolvidos principalmente em várias regulações pós-transcricionais (por exemplo, estabilização de mRNA ou ativação / silenciamento de tradução). A PCBP1, em particular, atua em múltiplos níveis no processo de expressão: como um repressor de tradução, um coativador de transcrição e como um regulador de processamento de RNA. No entanto, o papel da PCBP1 é desconhecido no coração. Aqui, pretendemos investigar o mecanismo funcional e molecular da proteína de ligação ao RNA PCBP1 no coração. Para uma melhor caracterização da PCBP1, realizaremos a análise in silico avaliando o locus do PCBP1 e examinaremos a expressão do long noncoding RNA nesta região, mapearemos os domínios de interação e potenciais RNAs de ligação a PCBP1. Avaliaremos a expressão do gene PCBP1 humano em amostras de pacientes com cardiomiopatia e a expressão de PCBP1 (mRNAs e proteínas) em ratos MDX (coração e músculo esquelético). Geraremos os camundongos PCBP1-KO específicos no coração para avaliar o envolvimento da PCBP1 na função e remodelamento cardíaco. Depois disso, estudaremos os mecanismos moleculares por genes/vias de sinalização nestes animais. Claramente a identificação de novos algos ligantes e a delineação dos mecanismos de controle e vias efetoras correspondentes estabelecerão modelos altamente informativos para uma exploração mais aprofundada.