Perfil de microRNAs de espermatozóides humanos e murinos coletados de diferentes partes do sistema reprodutivo

Resumo

Aproximadamente 50% da infertilidade humana ocorre por problemas relacionados à infertilidade masculina. Assim, as técnicas de reprodução assistida (TRAs), tais como as técnicas de extração e de aspiração de espermatozoides dos testículos, são empregadas para contornar estes problemas. No entanto, estudos recentes indicam que o emprego das TRAs pode ser associado com o aumento da incidência de malformações congênitas e defeitos epigenéticos dos descendentes. RNAs não codificadores (ncRNAs), tais como os microRNAs (miRNAs) e tsRNAs, são moléculas de RNA que não codificam proteínas e estão envolvidas no controle da expressão gênica por meio de mecanismos pós transcricionais, possuindo assim importante papel na biologia do desenvolvimento. Além disso, os ncRNAs podem escapar do processo de reprogramação, o que resulta no fato de que eles podem ser transmitidos para as próximas gerações. MiRNAs específicos de origem espermática, quando injetados em zigotos, podem induzir alterações epigenéticas. Essas alterações se assemelham às presentes nos doadores dos espermatozoides. Assim, a hipótese do nosso estudo é que espermatozoides obtidos dos testículos de homens e camundongos (espermatozoides imaturos) apresentam expressão diferente de miRNAs comparada com a presente nos espermatozoides obtidos das caudas dos epidídimos (espermatozoides maduros) e dos ejaculados (em humanos). Para isso, espermatozoides de testículos e da cauda de epidídimos de homens e camundongos e de ejaculados de homens serão obtidos e purificados. A extração de RNA e a análise de microarray serão realizadas. Após, os dados serão analisados por bioinformática para verificar a relação destes com o desenvolvimento embrionário. A análise de variância será realizada para verificar a diferença entre os perfis de expressão, sendo o teste de Tukey empregado quando necessário. O presente estudo será importante para elucidar os diferentes perfis de miRNAs de espermatozoides de diferentes origens e indicar se há relação com o desenvolvimento embrionário e alterações epigenéticas. (AU)