Papel do inflamassoma NLPR3 nas alterações vasculares promovidas pelo Diabetes tipo 1 em modelo induzido por estreptozotocina

Resumo

O diabetes mellitus (DM) está associado a diversas complicações micro e macrovasculares diretamente relacionadas a doenças cardiovasculares. A prolongada exposição a hiperglicemia e a resistência a insulina induzem estas complicações, as quais são exacerbadas pela disfunção endotelial. Mediadores inflamatórios contribuem potencialmente para o desenvolvimento da disfunção endotelial pela geração de espécies reativas de oxigênio (ERO). Por sua vez, o aumento de ERO, ou estresse oxidativo, estimula a transcrição de fatores pró-inflamatórios e favorece respostas inflamatórias. Receptores específicos, como os NLRs (NOD-like receptors, receptores do tipo NOD), especialmente a subfamília NLRP, contribuem de modo importante para instalação de processo inflamatório pela ativação do complexo inflamassoma. Este regula a ativação da caspase-1 e o processamento proteolítico dos precursores pró-IL-1b e pró-IL-18 nas citocinas maduras IL-1b e IL-18. Pouco é conhecido sobre o envolvimento de receptores NLR na disfunção vascular associada ao DM. Testaremos a hipótese que a deficiência genética do receptor NLRP3, e de componentes-chave do inflamassoma confere resistência à ativação de processo inflamatório e disfunção na vasculatura de animais com DM tipo 1, induzido quimicamente por estreptozotocina (STZ). E ainda, que padrões moleculares associados à lesão tecidual (DAMPs mitocondriais) contribuem para estas alterações vasculares. Para isso serão utilizados camundongos selvagens (wild type - WT) e deficientes em NLRP3, os quais serão submetidos a protocolo para indução de DM1-STZ. Cultura de células de músculo liso vascular e co-cultura com macrófagos serão realizadas para avaliação da ativação do inflamassoma NLRP3. Geração de ERO e ativação de caspase-1 também serão avaliadas nestas células. Parâmetros vasculares funcionais serão determinados em artérias mesentéricas de resistência. O diabetes reduziu a vasodilatação dependente de endotélio, o que não foi observado em artérias de animais nocautes para NLRP3. Animais diabéticos apresentaram aumento da expressão vascular do receptor NLRP3 e de caspase-1 e IL-1b. Houve aumento da liberação de DNA mitocondrial em artérias de animais diabéticos. O DNA mitocondrial diabético promoveu ativação do inflamassoma em CMLV. Estes resultados parciais demostram que o inflamassoma NLRP3 participa do processo de disfunção endotelial promovido pelo diabetes e ainda DNA mitocondrial está envolvido neste processo.