Desenvolvimento de métodos ultrassensíveis para a detecção de RNA visando o diagnóstico de Câncer de Cabeça e Pescoço

Resumo

Este projeto de pesquisa tem como objetivo desenvolver métodos para a detecção de µRNA como biomarcador visando o diagnóstico de Câncer de Cabeça e Pescoço (CECP) em amostras reais. Serão desenvolvidos e avaliados dois métodos baseados no uso de partículas magnéticas decoradas com uma sonda de RNA (PM-sRNA) planejada e sintetizada para as funções de captura, separação e detecção do µRNA. Em um dos métodos será feita a captura magnética do bioconjugado formado pela PM-sRNA e o µRNA (PM-sRNA-µRNA) diretamente sobre a superfície de um eletrodo descartável por meio de um imã posicionada atrás do eletrodo de trabalho. Em um segundo método o bioconjugado PM-sRNA-µRNA será detectado utilizando eletrodo descartável modificado com uma sequência complementar ao sRNA para captura do bioconjugado. Em ambos os casos serão desenvolvidos sensores eletroquímicos descartáveis com novas arquiteturas utilizando grafeno e nanopartículas semicondutoras (quantum dots) para a detecção eletroquímica fotoassistida, proveniente da redução/oxidação dos quantum dots, com elevada seletividade e baixo custo. Os eletrodos serão caracterizados por medidas de microscopias de força atômica (AFM), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), espectroscopia de difração de raios-X, reflectância difusa e técnicas eletroquímicas, tais como: voltametria cíclica e espectroscopia de impedância eletroquímica. Em um dos métodos serão utilizados arranjos. Os métodos desenvolvidos serão aplicados na determinação de µRNA em amostras reais de pacientes com Câncer de Cabeça e Pescoço que serão fornecidas em parceria com o Hospital do Câncer de Barretos. Espera-se com este projeto desenvolver métodos para detecção de µRNA simples, preciso, e de baixo custo visando o diagnóstico precoce de Câncer de Cabeça e Pescoço. (AU)