Expressão das enzimas acessórias polissacarídeo mono-oxigenase e celobiose desidrogenase de Aspergillus nidulans em Trichoderma reesei e avaliação da eficiência da degradação do bagaço de cana de açúcar

Resumo

O Trichoderma reesei é um dos principais fungos utilizados para a produção em larga escala de diversas enzimas, sendo um micro-organismo amplamente estudado. Isto é devido, principalmente, a grande capacidade de produção e secreção de celulases e hemicelulases para aplicação em processos de sacarificação da biomassa vegetal lignocelulósica. Tendo em vista a importância biotecnológica destas enzimas na degradação de biomassa vegetal, o T. reesei têm sido utilizado para a produção destas enzimas a baixos custos para a aplicação na despolimerização da biomassa, tendo maior enfoque para a produção de bioetanol. Com isso, o processo de degradação da fração celulósica da biomassa vegetal por celulases tem sido muito estudado devido ao seu alto potencial biotecnológico. Contudo, além da atuação das celulases, têm-se conhecimento de outras enzimas que auxiliam neste processo, denominadas enzimas acessórias. Estas enzimas, em associação com as celulases, permitem um aumento na despolimerização celulose, como é o caso das polissacarídeo mono-oxigenases (PMOs) e das celobiose desidrogenases (CDHs). Embora o T. reesei seja utilizado como um dos principais produtores de celulases a nível industrial, diversos processos e estudos ainda são realizados para aprimorar o entendimento de todo o mecanismo de reaproveitamento de biomassa vegetal além de prover o aumento da eficiência tanto da produção quanto da atividade das celulases. Sendo assim, o intuito deste trabalho é expressar e avaliar a influência de uma polissacarídeo mono-oxigenase e uma celobiose desidrogenase, ambas de Aspergillus nidulans, no processo de degradação de biomassa vegetal e produção de celulases pelo Trichoderma reesei. Para isso, será realizada a transformação de T. reesei para a obtenção de transformantes que expressem estas enzimas isoladamente e/ou em conjunto, sendo, posteriormente, avaliados quanto à degradação de bagaço de cana-de-açúcar por hidrólises enzimáticas; ensaios de determinação de açúcares redutores; cromatográfica liquida de alta eficiência e ensaios de determinação de viscosidade de uma solução de celulose. (AU)