Implementação de um método de dissecção de tétrades de Saccharomyces cerevisiae baseado em citometria de fluxo

Resumo

Leveduras adaptadas às condições industriais são consideradas plataformas adequadas para o desenvolvimento de linhagens comerciais aplicadas à produção de químicos derivados de matéria prima renovável, em especial os biocombustíveis. No entanto, compreender mecanismos genéticos relacionados à robustez ou combinar características industrialmente relevantes por cruzamentos requerem a obtenção e a análise de um grande número de segregantes. Em Saccharomyces cerevisiae, a obtenção de haplóides se dá tipicamente pela dissecção manual de tétrades, um procedimento extremamente laborioso dependendo do número de haplóides que se pretende obter. Neste contexto, a implementação de técnicas de dissecção de tétrades em escala high-throughput tem grande impacto na redução do tempo necessário para o estudo ou desenvolvimento de novas linhagens. Por essa razão, pretende-se implementar um método de análise e dissecção de tétrades baseado em citometria de fluxo e aplicá-lo no estudo de genes relacionados à termotolerância observada em linhagens industriais.