Utilização de proteínas recombinantes do vírus Zika no desenvolvimento de métodos de diagnóstico e aplicações vacinais

Resumo

O vírus Zika (ZIKV) pertence à família Flavividae, gênero Flavivirus, apresentando parentesco com outros vírus emergentes como o vírus dengue (DENV) e vírus da febre amarela (YFV), sendo também transmitido a humanos por picadas de mosquitos do gênero Aedes. A infecção por ZIKV apresenta caráter agudo e autolimitado, entretanto, manifestações graves como a Síndrome de Guillain-Barrée e a possível correlação com o desenvolvimento de microcefalia realçam a importância desta arbovirose, motivo de preocupação mundial na atualidade. Ainda não existem tratamentos efetivos ou vacinas disponíveis para a população, bem como métodos de sorodiagnóstico específico para esta infecção. Neste sentido, a busca de antígenos que apresentem baixa homologia com outros flavivirus e, portanto, permitam o desenvolvimento de testes sorológicos específicos, e que sejam potenciais antígenos vacinais é uma prioridade. Desta forma, o presente projeto tem por objetivo obter formas recombinantes de porções da proteína do envelope (E) e da proteína não estrutural 1 (NS1) do ZIKV que apresentem baixa homologia com outros flavivírus. Uma vez obtidas, essas proteínas serão empregadas no desenvolvimento de ensaios sorológicos específicos e formulações vacinais capazes de desencadear imunidade protetora contra o vírus. Para isso, o domínio III da proteína E e um fragmento da proteína NS1 (”Delta-NS1) do ZIKV serão expressos em sistema procarioto e purificados por técnica de cromatografia de afinidade. Os antígenos recombinantes serão utilizados para padronização de ensaios de sorodiagnóstico (ELISA, Western blot e imunofluorescência) discriminatórios para o ZIKV, sendo utilizados soros hiperimunes específicos para outros flavivirus (incluindo DENV e YFV) como controles de reatividade cruzada. Os antígenos citados também serão avaliados quanto ao seu potencial vacinal, os quais serão utilizados na composição de formulações a serem testadas em modelo murino, sendo avaliadas a magnitude e a funcionalidade das respostas imunológicas desencadeadas, bem como a capacidade protetora das mesmas frente ao desafio com cepa do vírus Zika em modelo murino. Assim, espera-se que o conhecimento gerado a partir desse trabalho possa contribuir para o desenvolvimento de diferentes métodos de sorodiagnóstico específico e estratégias vacinais eficazes contra o ZIKV. (AU)