Identificação de fatores que induzem a liberação de microvesículas contendo moléculas de superfície do Trypanosoma Cruzi envolvidas na invasão celular

Resumo

Observações recentes têm indicado que formas metacíclicas do Trypanosoma cruzi liberam espontaneamente moléculas de superfície para o meio, seja em vesículas ou na forma solúvel. Há também indicações de que diferentes cepas de T. cruzi liberam as referidas moléculas de maneira diferenciada e dependente do meio, o que influencia a invasão celular. Os fatores que determinam a liberação diferencial não são conhecidos. Vias de sinalização que são diferencialmente ativadas durante a invasão nas formas metacíclicas de cepas pouco invasivas, como a cepa G, ou muito invasivas como a cepa CL, teriam algum papel no processo de liberação de moléculas de superfície, em particular da gp82 e gp90, que funcionam respectivamente como mediador e regulador negativo da invasão celular? Para tentar responder essa questão e identificar os fatores envolvidos na liberação de gp82 e gp90 pelas formas metacíclicas das cepas G e CL, pretendemos: I) analisar por "Western blot" os níveis das moléculas gp82 e gp90 liberadas em diferentes meios pelos parasitas tratados ou não com diversas drogas que interferem com componentes envolvidos na sinalização, II) examinar a cinética de liberação de gp82 e gp90 em diferentes meios pelos parasitas tratados ou não com as diferentes drogas, III) determinar a capacidade de invasão celular das cepas G e CL na ausência e na presença de meio condicionado dos parasitas obtido em diferentes condições.