Envolvimento da autofagia nas alterações metabólicas e inflamatórias induzidas pela inativação de mTORC1 em adipócitos

Resumo

No presente projeto, testaremos a hipótese de que a via da autofagia é uma importante mediadora das alterações metabólicas, morfológicas e inflamatórias do tecido adiposo decorrentes da obesidade (ganho de função de mTORC1) ou da inativação de mTORC1 (perda de função) em adipócitos. Para isso, realizaremos 2 protocolos distintos: (1) camundongos C57BL6/J selvagens alimentados com dieta controle ou hiperlipídica serão tratados ou não com inibidor de autofagia cloroquina (WT) por 8 semanas com o objetivo de avaliarmos a interação entre mTORC1 e autofagia no contexto da obesidade. (2) camundongos selvagens (WT) ou com deleção de raptor em adipócitos (Raptor KO) alimentados com dieta hiperlipídica serão tratados ou não com cloroquina para avaliarmos a contribuição da autofagia nos fenótipos induzidos pela deficiência de mTORC1. Avaliaremos o ganho de peso, ingestão alimentar, gasto energético, adiposidade, diâmetro e número de adipócitos, as tolerâncias à insulina e à glicose, captação e metabolismo da glicose e de ácidos graxos, conteúdo e função mitocondrial, sinalização intracelular da insulina e inflamatória, o recrutamento e fenótipo de leucócitos e inflamação do tecido adiposo branco e fígado. Testes estatísticos apropriados serão empregados para análise dos resultados (GraphPad Prism 6.0). Dados serão expressos como média +/- SEM, nível de significância p<0,05.