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O uso de holding time associado a protocolos de criopreservação do sêmen suíno

Processo: 15/17620-7
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de julho de 2016
Vigência (Término): 30 de abril de 2017
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:André Furugen Cesar de Andrade
Beneficiário:Matheus Saliba Monteiro
Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Criopreservação   Sêmen animal   Corantes fluorescentes   Dinâmica mitocondrial   Citometria de fluxo   Modelos lineares mistos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Criopreservação | Holding time | sêmen suíno | sondas fluorescentes | Tempo de espera | Tempo de estabilização | Criopreservação de sêmen suíno

Resumo

O projeto pretende verificar se curtos períodos de Holding time (período em que o espermatozoide permanece em contato com o plasma seminal à 17ºC antes de ser submetido a criopreservação a -196ºC) podem substituir longos períodos (24 horas). Para realização do experimento será coletado 6 amostras de 6 cachaços (n=36). Após análise inicial do sêmen (in natura), as amostras serão diluídas em BTS e divididas entre os seguintes tratamentos: T0 (centrifugado assim que diluído), T4 (4 horas em contato com o plasma seminal a 17ºC), T8 (8 horas em contato com o plasma seminal a 17ºC), T12 (12 horas em contato com o plasma seminal a 17ºC) e T24 (24 horas em contato com o plasma seminal a 17ºC). Após o holding time, as amostras serão centrifugadas (500 x g/ 10 min) e os pellets serão diluídos a uma concentração final de 300 x 106 espermatozoides/mL em diluidor para criopreservação do sêmen suíno. Posteriormente, será realizado o envase em palhetas de 0,5 mL e a criopreservação em sistema automático. Após a descongelação, as amostras serão analisadas quanto as características da motilidade (CASA), a integridade das membranas plasmática e acrossomal, o potencial de membrana mitocondrial e a fluidez dos lipídeos de membrana por citometria de fluxo. Os dados serão submetidos à análise dos modelos mistos (PROC MIXED), empregando-se o programa SAS (2002).

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
TORRES, MARIANA A.; MONTEIRO, MATHEUS S.; PASSARELLI, MARINA S.; PAPA, FREDERICO O.; DELL'AQUA, JR., JOSE ANTONIO; ALVARENGA, MARCO ANTONIO; MARTINS, SIMONE M. M. K.; DE ANDRADE, ANDRE F. C.. The ideal holding time for boar semen is 24 h at 17 degrees C prior to short-cryopreservation protocols. CRYOBIOLOGY, v. 86, p. 58-64, . (15/17620-7, 16/24690-4, 16/09441-8)

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