Análise dos efeitos in vitro da ciclopamina em células de leiomiossarcoma uterino

Resumo

O leiomioma e o leiomiossarcoma são tumores de origem mesenquimal que se desenvolvem no útero. Essas neoplasias apresentam comportamento clínico variável, comprometendo a fertilidade e podendo até levar a morte. O leiomioma é um tumor benigno comumente encontrado nas mulheres em idade reprodutiva. Já o leiomiossarcoma representa cerca de 40% dos sarcomas do útero. Tanto o leiomiossarcoma quanto o leiomioma são neoplasias miometriais que apresentam o mesmo padrão de diferenciação celular, porém com progressão clínica completamente diferente. Diversos estudos têm demonstrado que a ativação aberrante da via de sinalização do Sonic Hedgehog (SHH) está relacionada ao desenvolvimento de vários tipos de câncer, uma vez que desempenha papel importante na proliferação e diferenciação celular. Em trabalho anterior, nosso grupo avaliou o perfil de expressão de moléculas envolvidas na via do SHH nos tumores mesenquimais do útero. As proteínas SMO, GLI1 e SHH mostraram-se hiperexpressas nos leiomiossarcomas, seguidos pelos leiomiomas e ausentes no miométrio normal adjacente. Esses resultados despertaram o interesse em avaliar o potencial terapêutico de inibidores da via nesses tumores, pois algumas dessas proteínas já foram inibidas em outras neoplasias com resultados muito promissores. Desse modo, o presente projeto objetiva avaliar, in vitro, a ação da ciclopamina como inibidor da via de sinalização do Sonic Hedgehog (SHH) em células de leiomiossarcoma uterino. Para isso, serão utilizadas linhagens celulares que serão submetidas à inativação de SMO por tratamento com a ciclopamina conforme já descrito na literatura para outros tumores. A eficiência da inibição da via será avaliada por Western Blott para SMO e moléculas alvo da via (BMP4, BCL-2 e CCND1). As células serão, após confirmação da inibição do alvo, avaliadas quanto à capacidade de migração e invasão. Todos os resultados serão submetidos à análise estatística.