Expressão estável e transiente do fator VII da coagulação em células humanas adaptadas para crescimento em suspensão e meios livres de soro fetal bovino

Resumo

O fator VII da coagulação é uma glicoproteína dependente de vitamina K, importante no processo de coagulação, sendo uma das moléculas envolvidas na formação do coágulo. Atualmente, o produto comercial é produzido na célula murina BHK-21, o que pode trazer desvantagens considerando a complexidade das modificações pós traducionais desta proteína. Células murinas não possuem a maquinaria necessária para realizar glicosilações idênticas ao padrão humano. Estas diferenças no padrão de glicosilação podem gerar respostas imunes e a proteína pode ser rapidamente eliminada da corrente sanguínea. Além disso, bioprocessos de produção de proteínas recombinantes têm focado no uso de células cultivadas em suspensão e em meios livres de soro fetal bovino. Baseado nisto, o objetivo deste projeto é expressar o fator VII da coagulação na célula humana Hek293 adaptada para crescimento em suspensão e meio de cultura livre de soro fetal bovino de maneira estável e transiente. Esta tecnologia, será depois aplicada às células que estão sendo usadas no projeto de doutorado. (AU)