O papel dos neutrófilos e dos receptores TLR 2 e TLR 4 na cromoblastomicose experimental em infecção por Fonsecaea pedrosoi

Resumo

A cromoblastomicose é uma micose subcutânea crônica e progressiva causada principalmente pelo fungo Fonsecaea pedrosoi. As infecções estabelecidas podem desenvolver lesões crostosas e exsudativas com formação de granulomas, compostos principalmente por macrófagos, neutrófilos, eosinófilos e linfócito. O F. pedrosoi é um fungo dimórfico e pode ser encontrado na forma de micélios e conídios (fase saprófita) e na forma de esclerótica (fase infecciosa) - caracterizada por células esféricas com parede celular espessa e pigmentada. A forma esclerótica é altamente resistente aos mecanismos imunológicos do hospedeiro permitindo, portanto, a instalação e progressão da doença. Diversos grupos veem estudando a importância da resposta imune inata e adquirida no combate a infeção por F. pedrosoi, porém, poucos são os trabalhos que observaram o papel dos neutrófilos - importante célula no combate a infecções fúngicas - na eliminação do F. pedrosoi. Deste modo, utilizando animais C57BL/6 tratados com anticorpos para depleção dos neutrófilos circulantes, verificaremos a importância destas células no combate ao F. pedrosoi. Utilizaremos também animais TLR 2 e TLR 4 knckouts para verificarmos a importância destes receptores frente à esta infecção. Experimentos in vitro serão realizados após a purificação dos neutrófilos da medula óssea desses animais para avaliarmos a função fagocítica, produção de espécies reativas de oxigênio, de óxido nítrico e a liberação de NETs (do inglês neutrophil extracllular traps). Utilizando anticorpos monoclonais para os receptores de Dectina-1 ou de complemento 3 (CR3) verificaremos o papel destes receptores nas funções acima descritas. Por fim, analisaremos a produção das citocinas IL-10, IL-12 e IL-17 e a produção de mediadores lipídicos como prostaglandina e leucotrieno pelos neutrófilos, bem como a importância dos receptores TLR 2, TLR 4, Dectina-1 e CR 3 na liberação destas substâncias. (AU)