Desenvolvimento de sonda fluorescente para determinação específica da atividade halogenante das enzimas mieloperoxidase e peroxidase de eosinófilos

Resumo

Peroxidases são enzimas que catalisam oxidações de diferentes substratos a partir da redução do peróxido de hidrogênio. As peroxidases presente em leucócitos, mieloperoxidase (MPO) e peroxidase de eosinófilos (EPO), se caracterizam por serem capazes de oxidar cloreto e brometo aos ácidos hipocloroso (HOCl) e hipobromoso (HOBr), respectivamente. Estes oxidantes se caracterizam por suas intensas reatividade e implicações em diversos processos deletérios bem estabelecidos e aceitos pela comunidade científica. No entanto, determinar a atividade dessas enzimas não é algo tão trivial, pois além de atuarem por meio de suas ações halogenantes (produção de HOCl e HOBr), estas enzimas atuam sobre diversos substratos por meio de suas ações peroxidásicas. Assim, os métodos para determinação das mesmas são muitas vezes indiretos ou pouco seletivos. Aqui, baseado em uma descoberta recente de nosso grupo de pesquisa, pretendemos desenvolver um método direto e seletivo para determinação da atividade halogenantes dessas enzimas. Trata-se do uso da sonda fluorescente dansilglicina, a qual reage prontamente com HOBr devido ao caráter eletrofílico do mesmo, sobre substratos não oxidáveis. Assim, nossa hipótese é que poderemos correlacionar a atividade halogenante dessas enzimas à alteração de fluorescência da sonda e dessa maneira propor uma nova técnica analítica para aqueles que necessitam estudar processos em que estas enzimas estão envolvidas. (AU)