Avaliação do potencial terapêutico de L-aminoácido oxidases isoladas de peçonhas de serpentes como antitumoral: estudos de genotoxicidade e expressão gênica

Resumo

As L-aminoácido oxidases isoladas e caracterizadas de peçonhas de serpentes (SV-LAAOs) tornaram-se importantes candidatas para modelos no desenvolvimento de novos fármacos e ferramentas biológicas. Estudos têm demonstrado que as SV-LAAOs, isoladas de diferentes gêneros de serpentes, são capazes de promover alterações no metabolismo de células cancerosas, como a indução de apoptose pela ativação de diferentes vias desse processo. Esse efeito farmacológico pode ser explicado, parcialmente, pela geração do peróxido de hidrogênio formado durante o ciclo catalítico das LAAOs. No entanto, dados relacionados aos possíveis efeitos genotóxicos e mutagênicos que essas proteínas de peçonhas podem causar às células humanas são muito escassos. O principal objetivo desse projeto é a identificação do perigo genômico que as LAAOs de Calloselasma rhodostoma (CR-LAAO), Bothrops jararaca (BjarLAAO-I) e Crotalus durissus terrificus possam oferecer às células humanas. Para isso, será investigada a capacidade dessas enzimas de causarem danos genotóxicos e mutagênicos em células humanas HepG2 e PBMC, utilizando ensaios in vitro que quantificam os danos gerados no DNA e nos cromossomos dessas células (ensaios do cometa e do micronúcleo). Além disso, vamos avaliar se o tratamento com diferentes concentrações das SV-LAAOs é capaz de induzir a ativação das vias de reparo do DNA, detectando a expressão de genes envolvidos nesse mecanismo. Esses dados serão muito importantes para o direcionamento de nossas pesquisas em busca do desenvolvimento de novos fármacos antitumorais mais eficazes ou mesmo coadjuvantes no tratamento de diferentes tipos de câncer.