PARTICIPAÇÃO DO T3 NO CONTROLE PÓS-TRANSCRICIONAL DA EXPRESSÃO DE HIF-1± E TGF± EM LINHAGEM CELULAR DE ADENOCARCINOMA DE MAMA E AVALIAÇÃO DO ENVOLVIMENTO DE POTENCIAIS miRNAs

Resumo

Inúmeros fatores de risco ambientais, condições patológicas e agentes fisiológicos, como os hormônios tireoidianos (HT), têm sido propostos por influenciar o desenvolvimento de câncer de mama (CM). Nosso grupo evidenciou, em estudos prévios a ação da Triiodotironina (T3) sobre diferentes genes em células de câncer de mama, por meio de microarray e uns desses genes estudados foram o fator induzido por hipóxia alfa (HIF-1±) e o fator de crescimento transformante alfa (TGF±), porém nesse estudo não foi avaliado o mecanismo de ação pelo qual o T3 regula a expressão desses genes e seu envolvimento em vias extra nucleares. Posteriormente, no mestrado da candidata em questão, abordamos ação nuclear e extra-nuclear do T3 na expressão gênica dos genes HIF-1± e TGF± em linhagens celulares de adenocarcinoma de mama, MCF-7. Nosso trabalho demonstrou que a expressão gênica de HIF-1± e TGF± está aumentada na presença T3, em linhagens de adenocarcinoma de mama, e foi observado que a ativação da via PI3K pelo T3 é necessária para a modulação dos genes HIF-1± e TGF±. Esses achados nos levam a novas investigações para elucidar as vias de ações do T3, por meio da utilização de drogas específicas para bloqueio de vias de sinalização intracelulares para abordagem de ações não genômicas dos HT, como PD98059 (inibidor da ERK/MAPK) e Peptídeo RGD (que se liga à integrina ±v²3; sitio de iniciação de várias ações das iodotironinas e seus análogos na membrana celular. Os tratamentos citados serão realizados em cultura com linhagens celulares de adenocarcinoma de mama (MCF-7), incubadas com T3, na presença e ausência dessas drogas, com posterior análise de expressão gênica (por RT-PCR) e expressão proteica (por Western Blot) dos genes HIF-1± e TGF±. Investigaremos também a participação de miRNAs envolvidos no câncer de mama, tais como miRlet-7a, miR-200a e miR-335, nos eventos desencadeados pelo HT, por meio da avaliação da expressão dos mesmos por RT-PCR.