Lipossomos como veículo de entrega do lncRNA INXS à células tumorais in vitro e in vivo para indução de apoptose

Resumo

RNAs não codificadores redefiniram o entendimento da regulação gênica. Um dos grupos dessas moléculas é o de RNAs longos não codificadores de proteínas (lncRNAs,> 200nt), que representam importantes agentes nessa regulação. O INXS é um desses lncRNAs que participa da regulação do splicing alternativo do éxon 2 do mRNA de BCL-X, um gene da família Bcl-2. Sabe-se que o aumento de INXS induz a conversão da isoforma BCL-XL antiapoptótica para a isoforma BCL-XS pró-apoptótica, o que aumenta em cerca de 8 a 10X a apoptose in vitro. A injeção intratumoral de plasmídeos de expressão de INXS in vivo durante 15 dias diminui em 10X o volume de xeno-enxertos de tumores humanos em camundongos. Essa propriedade será explorada aqui para respondermos a pergunta: Um lncRNA pode ser usado como agente injetável intravenoso contra o câncer? Para melhorar o mecanismo pelo qual o INXS é levado até os tumores, pretende-se usar lipossomos catiônicos atóxicos complexados com esse lncRNA. Para o direcionamento específico aos tumores, pretende-se usar o peptídeo GE11 na superfície dos lipossomos. GE11 tem propriedades similares ao EGF, porém sem induzir crescimento ou neoangiogênese. Os tumores visados apresentam a propriedade de superexpressarem EGF-R na superfície, fazendo desses receptores um alvo. Em paralelo pretende-se testar comparativamente os lipossomos com o plasmídeo pCEP-4-INXS usado no estudo anterior. Testes serão feitos para a construção dos lipossomos isolados carregados com lncRNA INXS, seguindo-se para obtenção destes lipossomos com o peptídeo GE11 na superfície, e continuando para ensaios in vitro em células e ensaios in vivo em animais.