Desenvolvimento e caracterização de nanopartículas de policaprolactona contendo paclitaxel funcionalizadas com bevacizumabe para a otimização da terapia do câncer de ovário

Resumo

O câncer de ovário (adenocarcinoma) ocorre em 50% dos casos de tumores malignos dos ovários e apresenta-se bilateralmente em 30 a 50% das pacientes. A alta letalidade deste tipo de câncer é decorrente ao diagnóstico tardio, sendo que no Brasil, em 2012, foram estimados aproximadamente 6.000 novos casos, e em 2010, aproximadamente 3.000 mortes. Esse tipo de câncer tende a ser agressivo e por não possuir um teste de detecção "precoce" a maioria das pacientes quando diagnosticadas estão no estágio III e IV da doença, estágios nos quais o câncer encontra-se disseminado na cavidade peritonial. Embora o paclitaxel seja o fármaco de escolha para o tratamento do câncer de ovário, este fármaco possui uma baixa solubilidade aquosa, o que reduz a sua biodisponibilidade. Por esse motivo, novas formulações estão sendo desenvolvidas sendo que o medicamento mais recente, o Taxol®, apesar de ter aumento da solubilidade do paclitaxel, apresenta toxicidade elevada por conter uma mistura de etanol e Cremophor EL® sendo que este último é um agente emulsificante tóxico que proporciona vários efeitos colaterais. Além disso, a resistência ao tratamento com este medicamento ocorre em mais que 70% dos pacientes. Desta forma, o desenvolvimento de novas formulações com paclitaxel é muito relevante. A nanotecnologia tem sido muito utilizada para a veiculação de vários fármacos e uma nova geração de nanopartículas sítio-específica tem sido desenvolvida possibilitando um aumento no efeito de permeabilidade e retenção (EPR) na vascularização do tumor auxiliando assim na penetração ativa de drogas anti-câncer. Esse direcionamento pode ser aumentado pelo acoplamento de anticorpos ou outros ligantes que reconheçam o antígeno associado ao tumor, aumentando, assim, a exposição às células malignas e diminuindo a exposição a células normais. Frente ao exposto, o objetivo do presente trabalho é desenvolver e caracterizar nanopartículas poliméricas contendo paclitaxel, funcionalizadas com anticorpo monoclonal, anti-HER2 bevacizumabe, visando a otimização do tratamento do câncer de ovário, avaliado através de culturas celulares e modelo animal. A caracterização físico-química envolverá a determinação da eficiência de encapsulação do fármaco, avaliação da integridade do anticorpo após conjugação à nanopartícula polimérica, medida de tamanho de partícula e potencial zeta, observação da morfologia por microscopia eletrônica de varredura e de transmissão e determinação in vitro do perfil de liberação de paclitaxel. As nanopartículas serão avaliadas quanto à eficácia e citotoxicidade dos sistemas obtidos em linhagens de células normais e tumorais, por MTT e citometria de fluxo, e in vivo, em modelo animal a partir da indução química do câncer ovariano. Por último, serão realizadas análises histopatológicas e avaliação da toxicidade das formulações desenvolvidas em modelo animal para câncer de ovário, com a realização de hemograma para monitoramento de TGO, TGP, creatinina e ureia. (AU)