Efeito comparativo da terapia laser de baixa potência e do ultrassom da baixa intensidade sobre o fenótipo de fibras musculares, estresse oxidativo e proteínas envolvidas na regulação do reparo muscular

Resumo

As lesões musculares representam um dos principais quadros clínicos encontrados no centro de reabilitação. Entre os principais recursos terapêuticos utilizados nas clinicas de fisioterapia para o tratamento de lesões muscular são o laser de baixa potência (LBP) e o ultrassom pulsado de baixa intensidade (USPBI). Ambos os recursos têm apresentado bons resultados no que diz respeito à modulação do processo de reparo muscular, porém ainda não há descrição na literatura de como poderia influenciar a determinação do fenótipo das fibras neoformadas quanto ao tipo de cadeia pesada de miosina (CPM) expressa e pouco se sabe sobre seus efeitos no estresse oxidativo. Além disso, existe a necessidade de determinar os mecanismos moleculares envolvidos, assim como, a metodologia e os parâmetros dosimétricos adequados. O objetivo da presente proposta será avaliar os efeitos da irradiação LBP e USPBI sobre a expressão das isoformas de CPM, a expressão e síntese de proteínas envolvidas no reparo muscular (miostatina e calcineurina) e o estresse oxidativo durante o processo de reparo do músculo esquelético de ratos. Serão utilizados ratos Wistar, divididos em 04 grupos: (1) Controle; (2) Criolesionados sem tratamento; (3) Criolesionados e tratados com LBP e (4) Criolesionados e tratados com USPBI. Os períodos de análise serão 3, 6, 12 e 24 horas para análise de estresse oxidativo e 3, 7 e 14 dias para análises de CPMs e calcineurina e miostatina. A criolesão consistirá de duas aplicações de bastão resfriado em nitrogênio líquido diretamente no músculo tibial anterior (TA). Para o tratamento com LBP será utilizado o equipamento da MMoptics AsGaAl (comprimento de onda de 780 nm) utilizando densidade de energia de 10 J/cm², potência de 40 mW e tempo de 10 segundos. Já o tratamento com US terapêutico será utilizando o equipamento Sonomaster® utilizando a frequência de 1 MHz, intensidade de 0,4 W/cm², modo pulsado a 1:4 ciclos, aplicação estacionária durante 3 minutos. Para a análise de expressão gênica será extraído o RNA total do músculo TA e será obtido o cDNA para a realização do PCR em tempo real utilizando primers específicos para cada gene citado e a análise proteica será realizada utilizando a técnica imunoenzimática de ELISA e Western Blotting, o estresse oxidativo será avaliado pela lipoperoxidação (LPO) e pelo dano a proteínas, e pela análise das enzimas antioxidantes: catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx). (AU)