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Estudo histológico e funcional da proteína galectina-1 em modelo murino de Conjuntivite alérgica tipo I

Processo: 14/17753-4
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de outubro de 2014
Vigência (Término): 30 de setembro de 2016
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
Pesquisador responsável:Cristiane Damas Gil
Beneficiário:Tamires Barbosa Lucena da Rocha
Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Inflamação   Conjuntivite alérgica   Mastócitos   Eosinófilos   Galectina 1   Lectinas   Imuno-histoquímica
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Eosinófilo | imuno-histoquímica | Inflamação ocular | Lectina | mastócito | Western-blot | Inflamação Ocular

Resumo

A galectina-1 (Gal-1) é proteína de 14,5 kDa capaz de controlar o processo de transmigração dos leucócitos, liberação de citocinas e desgranulação de mastócitos, contribuindo para a homeostase da reação inflamatória. Contudo, a expressão da Gal-1 em tecidos oculares normais e inflamados tem sido pouco estudada. Desse modo, analisaremos em a expressão e o mecanismo de ação da proteína Gal-1 em modelo experimental de conjuntivite alérgica (CA). Camundongos Balb/c machos serão imunizados nos dias 0 e 7, por via subcutânea, com ovalbumina (OVA; 5 µg) e nos dias 14, 15 e 16, receberão instilação direta no saco conjuntival de 250 µg de OVA em 10 µl de salina estéril. Outro grupo de animais sensibilizados serão pré-tratados intraperitonealmente ou por instilação nos dias 14 a 16 com a proteína Gal-1 recombinante (rGal-1; 0,3 µg por animal), diluída em 0,1 mL ou 10 ul de salina estéril, respectivamente. Os animais controles receberão apenas salina estéril. Após 4 e 24 horas do último desafio com OVA, os animais serão anestesiados, submetidos à punção cardíaca para obtenção de sangue e, posteriormente, sacrificados por deslocamento cervical para retirada das pálpebras, olhos e lavado peritoneal. Os estudos serão realizados por meio de: análises histopatológicas e quantitativas de mastócitos e eosinófilos nas conjuntivas; dosagens de IgE anti-ovalbumina e citocinas no sangue e lisado de olhos, e; imuno-histoquímica para detectar a expressão da Gal-1 e da quinase c-Jun N-terminal (JNK) nas conjuntivas palpebrais e células do lavado peritoneal. Os resultados contribuirão para o melhor entendimento da participação da Gal-1 nos processos inflamatórios oculares alérgicos e, possivelmente, para novas perspectivas terapêuticas.

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