Desenvolvimento de uma formulação vacinal contra a dengue baseada na proteína não estrutural 1 (NS1) administrada pela via intradérmica

Resumo

Neste projeto nós pretendemos desenvolver e caracterizar uma estratégia vacinal profilática contra o vírus da dengue, baseada na proteína NS1 em combinação com adjuvante. Para atingir este objetivo, a proteína recombinante NS1 DENV-2 e uma forma truncada da NS1 DENV 2 (DeltaC-NS1) serão expressas em E. coli e purificadas por cromatografia de afinidade ao metal. Formulações vacinais serão preparadas baseadas nas proteínas NS1 e DeltaC-NS1 como antígeno e administradas em camundongos BALB/C pela via intradérmica, em combinação com o adjuvante poly (I:C). As respostas imunológicas celulares anti-NS1 induzidas pelas formulações vacinais testadas serão monitoradas por meio de ensaios como ICS (Intracellular Citokine Staining), ELISPOT (Enzyme-Linked Immunosorbent Spot) e mensuração da atividade citotóxica in vivo. A resposta humoral anti-NS1 induzida será monitorada pela dosagem de IgG total e subclasses de IgG anti- NS1 por ELISA. Para avaliar a capacidade protetora conferida pelo regime vacinal, os camundongos serão desafiados com uma dose letal do vírus da dengue. Além disso, as possíveis respostas autoimunes induzidas pela imunização com NS1 e DeltaC-NS1 serão mensuradas pela reatividade cruzada com albumina sérica humana e plaquetas humanas em ensaios de ELISA. Assim, ao final do trabalho, nós esperamos gerar resultados e conhecimento que contribuirão para o desenvolvimento de uma estratégia vacinal eficaz contra o vírus da dengue. (AU)