Estudo in vitro da indução da produção de citocinas e da secreção de mucinases por cepas de EPEC atípicas indutoras de produção de muco

Resumo

Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) constitui um importante agente bacteriano de diarreia, em países em desenvolvimento, e produz lesão intestinal histopatológica característica. Cepas de EPEC típicas são portadoras de um plasmídio de virulência (EPEC adherence factor) que está ausente nas EPEC atípicas. Nosso grupo vem demonstrando que as EPEC atípicas apresentam características fenotípicas e determinantes de virulência bem mais diversificados do que as EPEC típicas, sendo que algumas das cepas estudadas têm apresentado propriedades inusitadas, como a capacidade de induzir aumento significativo na produção de muco, em alça ileal ligada de coelho in vivo, e de induzir aumento na transcrição de mRNA de genes de mucinas, em células caliciformes e enterócitos humanos em cultura. As mucinas, sintetizadas e secretadas pelas células caliciformes, são glicoproteínas majoritárias do muco que atuam na defesa contra estímulos externos como injúria mecânica, química e infecções por patógenos. Diversos patógenos estimulam a produção de muco, na interação com diferentes epitélios do hospedeiro, ao alterar a expressão dos genes de mucina em células caliciformes. Vários relatos também apontam que a resposta imune adaptativa parece modular as funções das células caliciformes, tendo sido já demonstrada a ativação mediada por IL-1, IL-4, IL-6, IL-8, IL-13 e TNF-± em células intestinais in vitro e/ou em modelos animais in vivo. Apesar da indução de muco aumentar a proteção da mucosa intestinal, alguns microrganismos secretam proteases específicas que clivam a mucina, favorecendo a aproximação a receptores das células hospedeiras. Recentes relatos indicam que as EPEC atípicas são patógenos emergentes, portanto, existe a necessidade de estudos visando conhecimentos sobre aspectos da sua interação com o hospedeiro e a ocorrência de novos mecanismos de virulência. Os mecanismos que induzem aumento da produção de muco por algumas cepas de EPEC atípicas ainda não estão determinados. Também se desconhece se essas bactérias produzem mucinases. Neste estudo, pretendemos examinar a interferência causada por duas cepas de EPEC atípicas indutoras de produção de muco nos fatores TNF-±, IL-1b e IL-8 em linhagens enterocíticas humanas (células Caco-2 e LS174T). Além disso, será pesquisada a capacidade de utilizar muco como substrato por meio da pesquisa de produção de mucinases em cepas selecionadas de EPEC atípica de coleção.