Investigação do papel da proteína DAZL no silenciamento dos retrotransposons

Resumo

As células germinativas primordiais (CGP) são as precursoras dos gametas, que são responsáveis pela transmissão das informações genéticas e epigenéticas para gerações seguintes. Durante o período embrionário as CGP passam por um processo importantíssimo para sua diferenciação normal, referido como reprogramação epigenética. Durante esta fase, ocorre demetilação global do seu DNA, tornando permissiva a expressão de determinados genes. Alguns deles são denominados retrotransposons, os quais representam sequências de DNA que se duplicam e se inserem pelo genoma. Esses retrotransposons geram variabilidade genética. Mas, por outro lado, o descontrole de sua expressão pode levar a instabilidade do genoma. Assim, as células germinativas desenvolveram mecanismos de controle da expressão de retrotransposons, os quais são fundamentais durante a reprogramação epigenética. Esse controle é realizado por piRNAs e proteínas PIWI. Estudos mostram que outra proteína específica das células germinativas, a MVH, participa deste controle através de interação com as proteínas PIWI. Estudo anteriores realizados por nosso grupo e por outros grupos sugerem que a proteína MVH apresenta padrão de expressão e também função semelhante ao da proteína DAZL, que também é específica das células germinativas. Baseando-se nessas informações, o objetivo deste estudo é investigar se a proteína DAZL exerce papel no controle da expressão dos retrotransposons. Para isto, serão utilizados embriões de rato Wistar de 16 dias pós-coito (dpc), os quais terão as gônadas removidas e submetidas ao tratamento com siRNA específico para o RNAm da proteína DAZL in vitro. Será analisada a expressão de retrotransposons e das proteínas PIWI, MVH e DAZL através de RT-PCR.