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Avaliação de um novo método de remoção do plasma seminal para criopreservação do sêmen caprino

Processo: 14/05984-1
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de maio de 2014
Vigência (Término): 30 de abril de 2015
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:André Maciel Crespilho
Beneficiário:Daniele Campos Do Nascimento
Instituição Sede: Universidade de Santo Amaro (UNISA). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Andrologia veterinária   Criopreservação   Inseminação artificial   Proteínas de plasma seminal   Sêmen   Especificação de sistemas e programas   Processos de separação   Modelos lineares   Caprinos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Bode | Criopreservação | Plasma Seminal | Sêmen | Sperm Filter | Andrologia veterinária

Resumo

A inseminação artificial (IA) empregando o sêmen criopreservado representa a principal e mais importante técnica de manejo reprodutivo para os animais de produção. Embora muitos aspectos relacionados à congelação do sêmen caprino tenham sido adaptados com êxito a partir do conhecimento adquirido na área de biotecnologia do sêmen bovino, algumas particularidades apresentadas pelo sêmen de bodes, como a presença da enzima fosfolipase A, exigem um processamento diferenciado para essas amostras. A remoção do plasma seminal representa uma etapa indispensável para a criopreservação do sêmen caprino, sendo geralmente realizada através de centrifugação. No entanto, estudos anteriores têm demonstrado que a centrifugação exerce efeito deletério sobre a viabilidade e integridade dos espermatozóides, justificando a busca por alternativas tecnológicas para remoção do plasma seminal caprino. Nesse sentido, o sistema SpermFilter® (patente 0700624-1; US 2010/0099075), um novo método de separação do plasma seminal foi recentemente proposto para o sêmen equino, apresentando vantagens em relação à centrifugação. O objetivo dessa proposta de pesquisa é a avaliação do sistema SpermFilter® para remoção do plasma seminal caprino previamente a criopreservação do sêmen. Ejaculados de 6 reprodutores adultos da raça Anglo Nubiana (n=5 ejaculados por bode) serão colhidos através de vagina artificial e fracionados em duas alíquotas iguais. Cada amostra será diluída em solução de Ringer com Lactato de Sódio previamente aquecido a 37°C de forma a fixar o volume final em 5mLs. Uma das alíquotas será destinada a centrifugação a temperatura ambiente por 10 minutos a 600xg (Grupo controle). A segunda fração será diluída na mesma solução e submetida à separação através no SpermFilter® (Grupo desafio). As amostras dos dois grupos serão criopreservadas em meio Tris gema de ovo frutose (TRIS) contendo 6,4% de crioprotetor glicerol e avaliadas nos momentos 0 (após diluição em meio TRIS), 1 (imediatamente após a congelação/descongelação) e 2 (3 horas após a descongelação) quanto a cinética espermática, integridade de membrana plasmática e contagem da concentração espermática. Os dados gerados serão avaliados através de modelo linear geral (GLM®, SAS Institute, Cary, USA), testando-se a hipótese de que a separação do plasma seminal usando SpermFilter® pode proporcionar um maior número de espermatozoides móveis e íntegros pós-descongelação.

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