Validação de um novo método para remoção do plasma seminal do sêmen caprino

Resumo

A conservação do sêmen para utilização em programas de inseminação artificial depende da redução reversível da motilidade e da atividade metabólica dos espermatozoides, que pode ser alcançada através da refrigeração ou congelação espermática. Para garantir a plena preservação dos espermatozoides, durante o processamento se faz necessário à adição de meios diluidores que promovam a proteção espermática. No entanto, a presença de fosfolipases presentes no plasma seminal de bodes limita o uso dos meios diluidores, especialmente daqueles que possuem gema de ovo como fonte lipoproteica, causando a degradação lipídica e formação de compostos tóxicos aos espermatozoides. Por essa razão, a maioria dos trabalhos voltados à preservação do sêmen caprino recomenda o uso da centrifugação para remoção do plasma, assumindo, no entanto, que esse tipo de processamento acarreta lesões à ultraestrutura espermática. Nesse sentido, o objetivo dessa proposta de pesquisa é a avaliação de um novo sistema de filtragem espermática originalmente desenvolvido para separação do plasma seminal de equinos, SpermFilter® (patente 0700624-1; US 2010/0099075), para o processamento do sêmen caprino. Ejaculados de 6 reprodutores adultos da raça AngloNubiana (n=5 ejaculados por bode) serão colhidos através de vagina artificial e fracionados em duas alíquotas iguais. Cada amostra será diluída em solução de Ringer Lactato de Sódio previamente aquecido a 37°C de forma a fixar o volume final em 5mLs. Uma das alíquotas será destinada a centrifugação a temperatura ambiente por 10 minutos a 600xg (Grupo controle). A segunda fração será diluída na mesma solução e submetida à separação através do SpermFilter® (Grupo desafio). As amostras dos dois grupos serão avaliadas nos momentos 0 (após diluição), 1 (imediatamente após separação) e 2 (3 horas após a remoção do plasma) quanto a cinética espermática (técnica computadorizada de avaliação espermática, ISAS V.1.2, Valência, Espanha), integridade de membrana plasmática em microscopia de epifluorescência e contagem da concentração espermática através de câmara hemocitométrica de Neubauer. Os dados gerados serão avaliados através de modelo linear geral (GLM®, SAS Institute, Cary, USA), testando-se a hipótese de que a separação do plasma seminal usando SpermFilter® pode proporcionar um maior número de espermatozoides móveis e íntegros após o processamento.