Estudo funcional da mutação TP53 p.R337H em linhagens celulares cultivadas sob condições alcalinas

Resumo

O gene TP53 é considerado o mais importante gene supressor de tumor e atua como um potente fator de transcrição, desempenhando um papel fundamental na manutenção da estabilidade genômica. A proteína p53 é formada por 393 aminoácidos e possui três domínios estruturais, um N-terminal de ativação, um central de ligação ao DNA e um C-terminal de oligomerização. Nas regiões sul e sudeste do Brasil, uma mutação no domínio C-terminal da p53 está associada com uma incidência significativamente alta de tumores adrenocorticais pediátricos (TAC). Esta mutação, caracterizada pela substituiçao de uma arginina por uma histidina no códon 337 (R337H), é responsável pela desestabilização da proteína em pH alcalino (8.0), sugerindo que tal sensibilidade ao pH poderia ser a base molecular para os TAC. Entretanto, nenhum ensaio funcional in vitro em pH alcalino foi relatado na literatura até o presente momento. Em trabalho recentemente publicado pelo nosso grupo, a presença da mutação TP53 p.R337H se mostrou associada com o aumento da expressão do gene Aurora-A em amostras de TAC pediátricos. O Aurora-A é membro de uma família formada por três homólogos de quinase de serina/treonina, que compreende além deste, os genes Aurora-B e Aurora-C. Os transcritos desses genes regulam o ciclo celular e atuam principalmente na mitose. A expressão dos genes Aurora-A e Aurora-B está desregulada em diferentes tipos de neoplasias, inclusive em TAC pediátricos, motivo pelo qual estas proteínas têm sido consideradas alvos interessantes para o tratamento do câncer. Em células deficientes do p53 a expressão desses genes está aumentada, e ambas as Auroras-A e B interagem com a p53 através da região C-terminal regulando sua estabilidade e função. Diferentes mutações no domínio C-terminal da p53 pode interferir com a ligação da p53 com as Auroras-A e B. Baseado nesses informações, o objetivo desse trabalho é estudar a atividade da TP53 p.R337H em linhagens celulares cultivadas sob condições alcalinas e investigar o papel desta mutação na interação da p53 com as proteínas Aurora-A e Aurora-B. Tais informações poderão auxiliar na compreensão dos mecanismos subjacentes a esta mutação e consequentemente no desenvolvimento de terapias mais eficazes e/ou individualizadas para os pacientes portadores da mutação TP53 p.R337H.