Estudos Moleculares das Vias de Sinalização mTOR e Tau nas Displasias Corticais Focais

Resumo

As epilepsias constituem um dos grupos de doenças neurológicas graves mais frequentes, afetando de 1,5 -2% da população mundial. Diversos tipos de malformações do desenvolvimento cortical (MDC) podem causar epilepsia e estão associadas à ocorrência de crises refratárias, incluindo a Displasia Cortical Focal (DCF). Esta se caracteriza por alterações citoarquiteturais observadas em outras MDC, como na Esclerose Tuberosa (ET) e a Hemimegaencefalia (HME). Semelhanças histológicas sugerem mecanismos patológicos comuns entre esses três distúrbios. A DCF, a ET e a HME também compartilham características relacionadas com uma sinalização anômala da via mTOR. Além da mTOR, há associação da via Tau com a DCF. Desta forma, a compreensão dos mecanismos patogênicos da DCF pode ser obtida através da relação com distúrbios similares. Já foi comprovada a relação entre ET, HME e mutações em mosaicismo. A identificação de mutações em estado de mosaicismo pode contribuir para o entendimento de doenças complexas, no entanto estas alterações não são detectadas pelo sequenciamento de Sanger. Sendo assim, a possibilidade de detectá-las pelas técnicas de sequenciamento de nova geração (NGS) representa uma nova perspectiva para a utilização desta tecnologia. O objetivo deste projeto é investigar se mutações em mosaicismo, nos genes das vias mTOR e Tau, estão envolvidas com mecanismos patológicos da DCF. Para tal, utilizaremos como estratégia o Deep Sequencing por NGS. Será sequenciado o DNA genômico de tecidos cerebrais provenientes de cirurgia de DCF e do sangue periférico dos pacientes, para aferir se o mosaicismo é restrito ao Sistema Nervoso Central. A captura das regiões será realizada com o kit Nextera Custom Enrichment Kit (Illumina) e as reações de NGS serão realizadas em um MiSeq. Esperamos com este projeto contribuir para o entendimento da etiologia genética e molecular da DCF, já que existem poucos dados a este respeito. Pretendemos utilizar o conhecimento gerado por este projeto em outras doenças cujo mecanismo de mutação por mosaicismo somático seja uma hipótese plausível para explicar a etiologia das mesmas.