Bioatividade de scaffolds experimentais a base de quitosana e colágeno sobre cultura de células pulpares humanas

Resumo

O capeamento pulpar direto (CPD) do tecido pulpar ainda é uma terapia com limitado número de opções clínicas, sendo baseada no emprego de materiais que causam uma necrose de coagulação do tecido pulpar, com conseqüente regeneração tecidual mediada pelas células pulpares. Neste estudo, um novo biomaterial (scaffold de quitosana e colágeno) para o CPD será avaliado, sendo o mesmo testado nas consistências esponjosa e injetável. A capacidade dos materiais em induzir células pulpares humanas (HDPCs) a depositar uma matriz mineralizada, sem gerar agressão celular, será avaliada. Ambos os scaffolds serão associados a diferentes substâncias bioativas (sinvastatina, vitamina D3 e TGF-ß), sendo os seguintes parâmetros celulares avaliados: migração celular ativa (trans-wells), viabilidade celular (Alamar Blue), migração celular para o interior do scaffold (microscopia de luz/MEV), diferenciação celular (atividade de ALP e PCR tempo real) e deposição de matriz mineralizada (Alizarin Red). Inicialmente as HDPCs serão semeadas sobre os scaffolds para avaliação da citotoxicidade, sendo a viabilidade e migração celular avaliadas. Em seguida, será determinada uma concentração para cada substância que promova aumento nos parâmetros celulares testados. Por fim, as substâncias serão adicionadas aos scaffolds e os mesmos parâmetros serão novamente estudados. A qualidade da matriz mineralizada depositada será observada por micro-CT em um modelo onde o scaffold será adaptado a discos de dentina humanos. Os dados numéricos obtidos através da aplicação dos protocolos laboratoriais serão submetidos a análise estatística específica.