AVALIAÇÃO HISTOLÓGICA E IMUNOHISTOQUÍMICA DE TILÁPIAS DO NILO (Oreochromis niloticus) VACINADAS CONTRA Streptococcus agalactiae

Resumo

A infecção causada por Streptococcus agalactiae provoca grandes perdas em sistemas de criação intensiva de tilápias no Brasil e uma das soluções para minimizar estas perdas é a utilização de vacinas. Assim, este estudo está avaliando a respostas dos tecidos e sua participação na resposta imune humoral induzida pela vacina contra S. agalactiae. Para tanto, serão utilizadas 206 tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) com peso médio de 200 ± 25 g. Será determinada a concentração bacteriana letal para 50,0% dos peixes (CL50) e avaliada a porcentagem relativa de sobrevivência (PRS) de tilápias vacinadas com as porções solúvel ou insolúvel do antígeno, resultantes do processo de sonicação do S. agalactiae. Para tanto serão utilizados quatro grupos (n= 20), sendo o grupo 1 (G1) injetado com solução salina 0,65% (controle), grupo 2 (G2) injetado com PBS + adjuvante incompleto de Freund, grupo 3 (G3) imunizado com a porção solúvel do antígeno sonicado + adjuvante incompleto de Freund e grupo 4 (G4) imunizado com a porção insolúvel do antígeno sonicado + adjuvante incompleto de Freund. Depois de 21 dias da imunização os peixes serão desafiados com inóculo de S. agalactiae e avaliados por 15 dias. Posteriormente será preparada a vacina contendo a porção de maior do antígenos que tenha conferido a PRS + adjuvante incompleto de Freund (1:1), com volume final de 200 µL. Para avaliar a reposta imune humoral serão utilizados dois grupos (n= 63), sendo eles; grupo injetado com salina 0,65% (controle) e grupo imunizado com a vacina constituída com o produto da sonicação do S. agalactiae que conferiu maior PRS. A vacina e a salina serão aplicadas por via intracelomática (i.c). Em todos os grupos será realizada uma coleta de sangue e órgãos pré imunização e coletas seriadas pós imunização nos tempos de 7, 14, 21, 28, 35, 42, 60 e 90 dias, para avaliação da resposta imune por meio de soroaglutinação direta em placa e para a confecção das lâminas histológicas e de imunohistoquímica. Os resultados serão comparados por meio de análise de variância (ANOVA) ao nível de 5% de probabilidade e a diferença entre as médias será comparada pelo teste de Tukey posteriormente.