Estudo da expressão dos genes TET e níveis de hidroximetilação em meduloblastoma.

Resumo

Meduloblastoma (MB) origina-se no cerebelo e representa o tumor cerebral maligno mais comum na infância. MB é tradicionalmente subdividido em cinco grupos histológicos relacionados ao prognóstico: MB desmoplásico, nodular, clássico, anáplasico e anáplasico de células grandes. Nos últimos anos, análises de expressão gênica e mutações em MB, possibilitaram a classificação em quatro subgrupos moleculares: (1) WNT; (2) SHH; (3) hiperexpressão de MYC e (4) anormalidades genéticas inespecíficas. As alterações epigenéticas como a hipermetilação de supressores tumorais desempenham um papel importante no desenvolvimento do MB. A redução da hidroximetilação e da expressão dos genes TET foram relatadas em vários tumores. Sabe-se também que a desregulação na função das enzimas TET pode estar associada com mutações nos genes IDH1 e IDH2. Apesar disso, ainda não se sabe muito sobre o perfil de hidroximetilação e a expressão dos genes TET em MB. Considerando esses dados, o presente projeto tem como objetivo avaliar a expressão dos genes TET1, TET2, TET3, IDH1 e IDH2 (normal e mutante), nível global de hidroximetilação, e a presença de hidroximetilação e/ou metilação em genes envolvidos nas vias SHH, WNT, NOTCH e BMP em amostras de pacientes portadores de MB. Para a análise da expressão gênica será utilizada a técnica de PCR em tempo real (sondas TaqMan). Será realizado o sequenciamento das amostras para verificar mutações em IDH1 e IDH2. O nível global de hidroximetilação será avaliado por técnica de hibridização (dot-blot). Para verificar a presença de metilação e/ou hidroximetilação em genes nas vias será utilizada PCR em tempo real associada à imunoprecipitação de 5-mC e 5-hmC.