Caracterização funcional e bioquímica do fator de transcrição rlmA e da interação de PkcA e Hsp90 no fungo Aspergillus fumigatus

Resumo

Aspergillus fumigatus é um fungo filamentoso patogênico oportunista responsável por diversas doenças respiratórias humanas, incluindo aspergilose invasiva pulmonar, que é a forma de infecção que causa risco a vida. A CWI (via de integridade da parede celular) é uma cascata de s inalização ativada nas células fúngicas sob condições de estresse de parede celular e desempenha um papel na adaptação de vários fungos patogênicos no hospedeiro humano. Em muitos fungos, CWI é desencadeada através da ativação da proteína quinase C (PKC) a qual está associada a ativação de uma cascata de MAP quinases a qual por sua vez leva a ativação de um fator de transcrição que habilita a transcrição de genes relacionados com a manutenção da integridade da parede celular e sua remodelação. Além da parede celular, a termotolerância é um dos determinantes de virulência mais importantes para o estabelecimento da infecção e a manutenção do patógeno no organismo hospedeiro, uma vez esta confere a capacidade de multiplicação do fungo em temperaturas elevadas (37 pC) causando por este fato micoses profundas. A "heat shock protein" HSP90 é uma chaperona molecular conhecidamente envolvida na adaptação térmica em outros organismos fúngicos e estabiliza diversas proteínas frente ao estresse provocado pelo calor. Recentemente nosso laboratório identificou uma interação entre a PkcA e Hsp90 indicando a participação desta na funcionalidade da CWI. Diante disso, este trabalho pretende ampliar o estudo da CWI em A. fumigatus através da caracterização funcional do fator de transcrição rlmA de A. fumigatus de forma a estabelecer sua função na manutenção da integridade e reforço da parede celular. A fim de identificar quais os genes relacionados a síntese e remodelamento da parede celular são controlados por rlmA serão realizadas ensaios de microarray e ChIP-PCR. Adicionalmente a natureza da interação genética entre a pkcA e hsp90 previamente observada será caracterizada a fim de compreender o papel de pkcA na via da CWI e na termotolerância desse organismo.