Estudo dos efeitos de uma fosfolipase A2 (MT-III) isolada do veneno da serpente Bothrops asper em células de músculo liso vascular em cultura: formação de corpúsculos lipídicos e mecanismos envolvidos.

Resumo

Os venenos de serpentes do gênero Bothrops contêm concentrações elevadas de fosfolipases A2 secretadas (sFLA2), que apresentam homologia estrutural e funcional com as FLA2s de mamíferos, do mesmo grupo, cujos níveis estão aumentados em doenças inflamatórias, como a aterosclerose. A MT-III, uma sFLA2 Asp-49, do grupo IIA, isolada do veneno da serpente Bothrops asper, além de miotóxica, apresenta uma ação inflamatória marcante. Em modelos experimentais in vitro, esta enzima ativa funções de macrófagos, tais como a produção de agentes microbicidas, a fagocitose e a liberação de ácido araquidônico, mediadores lipídicos e citocinas. Além disso, a MT-III induziu, em macrófagos, um aumento da formação de corpúsculos lipídicos (CLs) e a expressão da PLIN2, proteína envolvida no metabolismo lipídico e relacionada ao acúmulo de lipídeos em CLs. No entanto, não são conhecidos os efeitos desencadeados pela MT-III, ou pelas sFLA2s de mamíferos, em outras células capazes de acumular lipídios, como as células de músculo liso vascular, que são relevantes em doenças relacionadas ao desequilíbrio lipídico, como a aterosclerose e doenças cardiovasculares. Desse modo, este estudo tem por objetivo avaliar os efeitos da MT-III em células de músculo liso vascular, com ênfase na formação de CLs e os mecanismos envolvidos nesse efeito. Para tanto, serão avaliados os efeitos da MT-III quanto à: i) formação de CLs, ii) distribuição e a expressão gênica e proteica das PLIN2 e PLIN3, iii) expressão do receptor CD36 e SRA1, iv) expressão e ativação dos receptores PPAR-gama e PPAR-delta/beta, v) participação das enzimas DGAT e ACAT e dos receptores CD36,SRA1,PPAR-gama e PPAR-beta/delta na formação de CLs, vi) liberação e distribuição intracelular da prostaglandina E2, vii) liberação TNF-alfa, IL-1, MCP-1 e fractalcina e viii) expressão das proteínas relacionadas ao efluxo lipídico ABCA1 e ABCG1. Este trabalho deverá contribuir para o entendimento das ações desencadeadas por fosfolipases A2 secretadas em processos inflamatórios e àqueles associados ao desequilíbrio lipídico, com o potencial de evidenciar novos alvos terapêuticos em doenças em que esse desequilíbrio seja um fator preponderante. Ainda, este estudo contribuirá para o melhor conhecimento da fisiopatologia da reação local causada por venenos botrópicos.