Análise do conteúdo microbiológico e endotóxico de infecções endodônticas primarias e abscessos periapicais e sua relação com a sintomatologia clínica e os níveis de citocinas pró-inflamatórias, MMPs e Substância P

Resumo

O principal fator de virulência das bactérias Gram-negativas é representado pela liberação de endotoxinas (LPS) presentes na membrana externa da parede celular bacteriana. O acúmulo destes componentes bacterianos no canal radicular e a sua saída para os tecidos periapicais podem produzir uma reação antígeno-anticorpo gerando uma resposta inflamatória, conhecida clinicamente como periodontite. Assim, o presente estudo tem por objetivos isolar e identificar microrganismos anaeróbios Gram-negativos através de métodos moleculares de clonagem de amostras obtidas de canais radiculares de dentes com necrose pulpar e lesão periapical assintomáticos e de canais radiculares de dentes com necrose pulpar, sintomatologia dolorosa e abscessos periapicais; quantificar os níveis de LPS e correlaciona-los com a expressão de citocinas pró-inflamatórias, metaloproteinases (MMPs) e Substância P. Serão selecionados pacientes com necessidade de intervenção endodôntica por necrose do tecido pulpar e presença de lesão periapical que não apresentem sintomatologia dolorosa (n=12), assim como pacientes com sintomatologia dolorosa e abscesso periapical (n=12), totalizando 24 dentes. Como grupo controle serão selecionados pacientes com necessidade de tratamento endodôntico por indicação protética em dentes com vitalidade pulpar (n=6). Amostras de endotoxinas e microbiológicas serão coletadas antes do preparo químico-mecânico (PQM), depois do PQM, depois do uso de EDTA 17% e depois de 30 dias da primeira sessão. Amostras para quantificação de IL-1±, IL-1², TNF±, PGE-2, MMP-2, MMP-3, MMP-8, MMP-9, MMP-13 e Substância P também serão coletadas, passando um cone de papel 1 mm além do ápice radicular depois do PQM e depois do uso de medicação intracanal (MIC). As amostras microbiológicas serão diluídas, plaqueadas e incubadas para posterior isolamento e clonagem. As amostras de LPS serão analisadas pelo método Limulus Amoebocyte Lysate (LAL). As amostras para dosagem de citocinas, MMPs e Substância P coletadas do periapice serão quantificadas utilizando kits específicos para dosagem em amostras humanas por testes imunoenzimáticos [Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)]. Os valores obtidos serão tabulados e estatisticamente analisados.