Mutação do gene da fosfoglicomutase em Xanthomonas citri subsp. citri para avaliação da fitopatogenicidade da linhagem mutante

Resumo

O cancro cítrico é uma doença atualmente sem tratamento e que ataca os citros em vários países produtores, trazendo grandes prejuízos. É causado por bactérias do gênero Xanthomonas, pertencentes às espécies X. citri (Xac) e X. fuscans. Análises proteômicas comparativas de frações subcelulares de Xac realizadas em nosso laboratório (LBBMM, UFSCar) como parte de Projeto Jovem Pesquisador (Processo 07/50910-2), evidenciaram a maior expressão da fosfoglicomutase (PGM) em situação de indução da patogenicidade in vitro em Xac e, consequentemente, o seu possível envolvimento na fitopatogenicidade dessa bactéria. A PGM tem envolvimento na mobilização e estocagem de recurso energético e atua na biossíntese de carboidratos extracelulares (biofilmes) em Xanthomonas spp. Estudos sobre o efeito da inativação da PGM na sua fitopatogenicidade são escassos. Os dados mais próximos somente comprovam o seu envolvimento na síntese da goma xantana em X. campestris. Este trabalho visa a obtenção de uma linhagem mutante de Xac para o gene da fosfoglicomutase, por meio de deleção gênica. A metodologia a ser utilizada será padronizada no presente trabalho e consistirá na clonagem in tandem das regiões flanqueadoras 5´e 3´do gene de interesse em vetor pNPTS138, o qual, após introdução em Xanthomonas, permitirá a deleção do gene cromossomal por meio de evento duplo de recombinação. A linhagem mutante obtida será comparada ao tipo selvagem quanto ao seu potencial infeccioso in vivo. Os resultados deste trabalho poderão evidenciar pela primeira vez a relação da fosfoglicomutase com a patogenicidade de Xac. Além disso a metodologia padronizada possibilitará que sejam obtidos futuramente outros mutantes para genes de interesse biotecnológico em Xac.