Estudos experimentais do efeito do di-n-butil ftalato e do mono-(2-etilhexil) ftalato sobre o desenvolvimento testicular de roedores

Resumo

O desenvolvimento pós-natal dos testículos envolve a proliferação e a diferenciação de três tipos celulares: as células de Sertoli, as células de Leydig adultas e as células germinativas. Os gonócitos são os precursores das células germinativas masculinas, encontrados durante o período fetal e neonatal. Sua diferenciação neonatal é fundamental para a função reprodutora e envolve retomada da atividade proliferativa, movimentação para a base do epitélio seminífero e diferenciação em espermatogônia. Estudos têm revelado que essas células são alvos diretos de andrógenos endógenos e de desreguladores endócrinos que agem como antiandrógenos. O di-n-butil ftalato (DBP) é um exemplo de desregulador endócrino capaz de provocar uma iniciação inapropriada da divisão celular e o aumento no número de células de Leydig, devido à diminuição dos níveis de testosterona no testículo fetal. Embora no período fetal a atividade proliferativa dos gonócitos seja andrógeno-dependente, existem evidências que a sensibilidade androgênica seja perdida na transição para a espermatogônia. Também existem evidências da ação antiandrogênica do DBP no testículo de outros roedores, mas isso permanece desconhecido para o gerbilo da Mongólia. Esse estudo objetiva avaliar se a exposição gestacional ao di-n-butil ftalato interfere no desenvolvimento pós-natal do testículo do gerbilo da Mongólia, em particular nos gonócitos. Serão utilizados filhotes machos de mães normais e tratadas com DBP nas idades 1, 7, 14, 28 e 35 dias pós-parto (n=12 por grupo). O DBP será administrado, por gavagem, em uma concentração de 100mg/Kg/dia, do dia gestacional 8 ao 24. Os testículos serão processados para microscopia de luz e, com base em métodos morfométricos e estereológicos, será avaliado o número total de gonócitos dos neonatos e o volume dos principais componentes teciduais desse órgão. Também será examinada a cinética de proliferação e morte dos gonócitos, tendo como base testes imunocitoquímicos para o antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA) e para a proteína VASA, e o método do TUNEL. Serão analisadas as variações nos níveis plasmáticos dos esteroides sexuais e a expressão testicular de receptores de andrógeno (AR), receptor de estrógeno ± (ER±) e da enzima 17²-hidroxiesteróide desidrogenase (17²-HSD). A presente proposta ampliará o conhecimento sobre os mecanismos relacionados à diferenciação neonatal dos gonócitos, em situações de alteração no ambiente esteroidal intrauterino, em decorrência da exposição ao ftalato. (AU)