Análise in vitro da proliferação celular e produção de mediadores inflamatórios por células da conjuntiva estimuladas por materiais utilizados na confecção de próteses oculares

Resumo

A prótese ocular é utilizada para a reabilitação estética da ausência ocular. O conhecimento da sua biocompatibilidade é importante para garantir segurança na utilização. O objetivo desse estudo é avaliar a citotoxicidade de materiais utilizados na confecção de próteses oculares, por meio da análise in vitro da proliferação celular e produção de mediadores inflamatórios por células da conjuntiva. Serão confeccionadas 27 amostras em forma de disco (10mmx1mm) e distribuídas em 9 grupos (n=3): resina N1 termopolimerizada pelo método convencional (RTC); resina N1 termopolimerizada por energia de microondas (RTM); resina N1 autopolimerizada (RA); resina N1 + pigmento, termopolimerizada pelo método convencional (RpTC); resina N1 + pigmento, termopolimerizada por energia de microondas (RpTM); resina N1 + pigmento, autopolimerizada (RpA); pigmento polimerizado pelo método convencional (pTC); pigmento polimerizado por energia de microondas (pTM); pigmento autopolimerizado (pA). Para a preparação dos extratos desses materiais, as amostras serão colocadas em tubos de ensaio contendo 9 mL de meio de cultura DMEM e incubados a 37 oC por 24 horas. Em seguida, a citotoxicidade dos extratos será avaliada pelo ensaio de MTT em cultura de células Chang, originária da conjuntiva ocular humana. Será avaliada a produção das citocinas IL-1, IL-6 e TNF- ± e a quimiocina CCL3/MIP-1± por meio do ELISA e, a expressão de mRNA para Colágeno tipo I, TGF-² e MMP-9, por meio da técnica de RT-PCR. Os dados serão submetidos ao teste de aderência à curva normal, sendo então aplicado o teste estatístico adequado e, serão examinados de acordo com a ISO-standard 10993-5, a qual descreve os métodos in vitro para a avaliação da citotoxicidade.