Influência do cálcio e das proteínas MIRO sobre o transporte mitocondrial em neurônios humanos derivados de células troncos de pluripotência induzida de pacientes de Alzheimer

Resumo

A maioria dos casos da doença de Alzheimer (AD) são esporádicos (sAD), porém, uma pequena fração (5%) de AD é familiar (fAD), devido à herança de genes mutados. Mutações nos genes das presenilinas (PS1 e PS2) são responsáveis por 40% dos casos familiares de AD. A mutação mais grave na PS1 induz a substituição de dois aminoácidos e a deleção do exon 9 (PS1-”E9), desencadeando o excesso de produção de beta-amiloide (Ab), provocando a formação de oligômeros de Ab e o aumento das concentrações intracelulares de Ca2+. Evidências demonstram que o aumento das concentrações intracelulares de Ca2 + induz a inibição do transporte mitocondrial, através da ligação do Ca2 + aos domínios EF hands da proteína miro, além disso o comprometimento do transporte mitocondrial tem sido relatado durante os estágios inicias de AD e relacionado com a patofisiologia de AD. Com base do no exposto acima esse projeto tem como hipótese que a interrupção do transporte mitocondrial poderia ser desencadeada pelo aumento das concentrações intracelulares de Ca2+, promovendo a agregação proteica e a neurodegeneração em AD. Nosso grupo identificou evidências que apoiam essa hipótese em culturas de células de ratos Lewis expostos à rotenona. O próximo passo é a confirmação da relação entre Ca2+ e as proteínas miro e sua influência no transporte mitocondrial em neurônios humanos contendo o background genético relacionado com AD. Desta maneira o presente estudo tem como objetivo avaliar miro-1, níveis de Ca2+, transporte mitocondrial e a formação de agregados proteicos em neurônios derivados de células-tronco de pluripotência induzida (iPSC) de fibroblastos de pacientes fAD contendo a mutação PS1-”E9 , pacientes sAD e pacientes controles sem demência. (AU)